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以BSA和RNA为键合配体的树枝状大分子修饰的开管毛细管电色谱柱的制备
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毛细管电色谱(capillary electrochromatography，CEC)是一种微柱分离技术，它结合了毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis，CZE)的高效性和高效液相色谱(HPLC)高选择性的优点，具有高效、快速、微量的特点。OT．CEC中没有塞子、填料和涡流扩散，因此避免了塞子效应、焦耳热、气泡等一系列困扰PC．CEC的问题。而且OT—CEC可采用较短的柱子，实现快速高效的分离。 在以前研究的基础上，以3一氨丙基三乙氧基硅烷做硅烷化试剂，丙烯酸甲酯为马氏加成试剂，乙二胺为酰胺化试剂，通过多次重复马氏加成反应、酰胺化反应，在毛细管内壁成功键合了聚酰胺一胺(PAMAM，晨源)树枝状大分子，制得了l代、2代、3代PAMAM修饰的开管毛细管电色谱柱。 在不同代数PAMAM修饰的开管毛细管电色谱柱的内壁进一步键合BSA配体，获得了以树枝状大分子PAMAM为间隔臂，BSA为配体的新型亲和毛细管电色谱柱，采用荧光标记法对所合成的BSA修饰的开管毛细管电色谱柱进行了表征。利用此亲合电色谱柱，成功分离了DL色氨酸。结果显示了以树枝状大分子做间隔臂的毛细管电色谱柱比直接在硅烷化试剂上键合BSA的毛细管电色谱柱具有明显的分离优势。同时，尝试分离了卵清蛋白，获得了较好的效果。 在前期工作的基础上，在不同代数PAMAM修饰的开管毛细管电色谱柱内壁键合RNA配体，获得了以树枝状大分子PAMAM为间隔臂，RNA为配体的新型亲和毛细管电色谱柱，并对不同代数PAMAM修饰的色谱柱对溶菌酶和核糖核酸酶A的分离进行了比较。结果显示，在最优化条件下，以三代PAMAM为间隔臂，RNA为配体的色谱柱的分离效果最好。同时，在最佳条件下，成功地分离了β-酪蛋白和α-乳白蛋白。 |
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