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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Streptavidin（链抗生物素）的分子结构式是怎么样的？
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安蓉

木虫 (正式写手)

[交流] Streptavidin（链抗生物素）的分子结构式是怎么样的？

请教大家一个问题：我想用牛血清蛋白BSA改性AFM的探针针尖，除了化学改性的方法，还有其他方法吗？我找到一个方法如下：

“利用AFM 来测定配体-受体之间作用力的样品制备为例子，其过程大致如下：
配体必须固定于AFM 尖端。我们用链抗生物素对尖端进行功能化处理。将AFM 悬臂浸入乙酮 5 分钟，然后紫外线照射 15 分钟；在37 °C的湿润孵化器中，悬臂浸入一滴50 ml 生物素-BSA（牛血清蛋白），孵育过夜；用PBS 磷酸缓冲液（pH 7.4）洗三次，除去非结合蛋白；室温下悬臂浸入一滴50 ml 链抗生物素中，孵育 10 分钟，在碱性环境中，使BSA吸附于悬臂；悬臂使用前，用PBS再冲洗三次即可。总之，将特定的配体或者受体固定于悬臂探针表面，将与之对应的受体或者配体固定于基底表面。在悬臂探针表面与基底表面相接近或者分离的过程中，悬臂受到偏折，从而测得两个功能化表面之间的作用力。即配体-受体之间的作用力。”
但是我不知道它的原理是怎么样的？是不是利用链抗生物素先改性针尖，然后再用生物素去结合，然后把BSA的头露在外面呢？
谢谢大家的帮助
谢谢。
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1楼 2012-12-11 19:27:56
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
★ ★ ★
安蓉(金币+1): 谢谢参与
安蓉: 金币+2 2012-12-12 12:44:09
AFM尖端-BSA--生物素--------------链抗生物素

BSA--生物素是共价键结合

生物素--------------链抗生物素 是抗原抗体之间非共价键结合

链抗生物素是一个60kd的蛋白，能专一结合生物素
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2楼2012-12-12 09:45:49
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安蓉

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-12 09:45:49
AFM尖端-BSA--生物素--------------链抗生物素

BSA--生物素是共价键结合

生物素--------------链抗生物素 是抗原抗体之间非共价键结合

链抗生物素是一个60kd的蛋白，能专一结合生物素

请问大侠邮箱多少，我想跟您深度交流一下这块。因为我想让BSA露在外面，去测试BSA和其他表面的作用，所以应该怎么连呢？谢谢您。
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4楼2012-12-12 12:45:12
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
★ ★
安蓉: 金币+2 2012-12-14 21:12:14
AFM尖端-BSA--生物素--------------链抗生物素--生物素--BSA

这样可以解决楼主的问题吗？
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6楼2012-12-12 19:13:37
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Chengxm

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★
安蓉(金币+1): 谢谢参与
安蓉: 金币+2 2012-12-13 13:01:43
biotin----Avidine?
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10楼2012-12-12 20:55:50
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安蓉

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Chengxm at 2012-12-12 20:55:50
biotin----Avidine?

您提到的这两者的分子结构式是多少呢
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12楼2012-12-13 13:01:38
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Chengxm

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2012-12-14 12:32:45
安蓉: 金币+4 2012-12-14 17:40:58
Biotin also known as vitamin H or coenzyme R,[2] is a water-soluble B-vitamin (vitamin B7).

It is composed of a ureido (tetrahydroimidizalone) ring fused with a tetrahydrothiophene ring. A valeric acid substituent is attached to one of the carbon atoms of the tetrahydrothiophene ring. Biotin is a coenzyme for carboxylase enzymes, involved in the synthesis of fatty acids, isoleucine, and valine, and in gluconeogenesis.

Avidin is a tetrameric or dimeric[1] biotin-binding protein produced in the oviducts of birds, reptiles and amphibians deposited in the whites of their eggs. In chicken egg white, avidin makes up approximately 0.05% of total protein (approximately 1.8 mg per egg). The tetrameric protein contains four identical subunits (homotetramer), each of which can bind to biotin (Vitamin B7, vitamin H) with a high degree of affinity and specificity. The dissociation constant of avidin is measured to be KD ≈ 10−15 M, making it one of the strongest known non-covalent bonds.[2]

In its tetrameric form, avidin is estimated to be between 66–69 kDa in size.[3] Ten percent of the molecular weight is attributed to carbohydrate content composed of four to five mannose and three N-acetylglucosamine residues.[4] The carbohydrate moieties of avidin contain at least three unique oligosaccharide structural types that are similar in structure and composition.[5]

Functional avidin is found only in raw egg, as the biotin avidity of the protein is destroyed by cooking. The natural function of avidin in eggs is not known, although it has been postulated to be made in the ovaduct as a bacterial growth-inhibitor, by binding biotin the bacteria need. As evidence for this, streptavidin, a loosely related protein with equal biotin affinity and a very similar binding site, is made by certain strains of Streptomyces bacteria, and is thought to serve to inhibit the growth of competing bacteria, in the manner of an antibiotic.[6]

A non-glycosylated form of avidin has been isolated from commercially prepared product; however, it is not conclusive as to whether the non-glycosylated form occurs naturally or is a product of the manufacturing process.[7]

200px-Biotin_structure_JA.png
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13楼2012-12-14 11:55:39
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安蓉

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-12 19:13:37
AFM尖端-BSA--生物素--------------链抗生物素--生物素--BSA

这样可以解决楼主的问题吗？

谢谢您的回答，其实我想用BSA改性AFM针尖的，那您的意思是BSA可以直接粘在tip上吗？期待您的回复。感谢感谢。
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14楼2012-12-14 21:12:06
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套大侠0702123楼
2012-12-12 10:20   回复  
安蓉(金币+1): 谢谢参与
安蓉: 金币+1 2012-12-12 12:46:14
来顶一下！
tangbohejin5楼
2012-12-12 12:54   回复  
安蓉(金币+1): 谢谢参与
xjy07917楼
2012-12-12 19:22   回复  
安蓉(金币+1): 谢谢参与
来顶一下！
假大空8楼
2012-12-12 19:45   回复  
安蓉(金币+1): 谢谢参与
readytogo9楼
2012-12-12 20:42   回复  
安蓉(金币+1): 谢谢参与
樱木花道611楼
2012-12-12 21:50   回复  
安蓉(金币+1): 谢谢参与
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