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xolive

银虫 (小有名气)

[求助] 商品酶制剂的电泳分析

各位大侠,请问我做商品碱性蛋白酶的电泳分析,为什么电泳结果显色不明显呢?是否需要特殊处理?比如说透析等~请指教!谢谢
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Tporker

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-12-11 17:04:16
xolive: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-17 14:44:01
有Maker吗?跟Marker相比颜色是明显比较弱么?如果Marker也是很弱,那可能是你用的染色液有问题。如果Marker很亮,蛋白样品比较弱,很可能是上样量小,可以采用加大上样量,或者对样品进行浓缩。
值,夜渐浓,闻窗外蛙鸣,辗转无眠难入梦;此,风渐清,听庭内雨应,悱恻浮醒忆青笼。
2楼2012-12-11 15:32:12
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xolive

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Tporker at 2012-12-11 15:32:12
有Maker吗?跟Marker相比颜色是明显比较弱么?如果Marker也是很弱,那可能是你用的染色液有问题。如果Marker很亮,蛋白样品比较弱,很可能是上样量小,可以采用加大上样量,或者对样品进行浓缩。

mark显色很明显。。。,上样量我都是20mg/ml了!
3楼2012-12-11 18:13:55
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xolive: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-17 14:44:14
电泳时加入已知浓度的BSA作为对照,确定你的酶制剂准确的浓度
天道酬勤
4楼2012-12-12 15:55:19
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xolive: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-17 14:44:21
如果是干燥商品酶,那么质量只能表示干重,包括很多盐或者缓冲液,酶的比列很小的。

如果是纯酶,还要考虑一个问题,有些酶是很难染色,和氨基酸组成相关的,曾经遇到过染不上色的蛋白。可以考虑用银染,因为原理不一样,可能会有比较好的改观。
行至水穷处,坐看云起时
5楼2012-12-15 18:32:22
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
xolive: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-17 14:44:27
商品酶配入很多辅料的,目标酶占很少、非常少比例,由其是酶活在同类产品中比较低的产品
6楼2012-12-16 15:23:15
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egaoxy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by fm707755 at 2012-12-16 15:23:15
商品酶配入很多辅料的,目标酶占很少、非常少比例,由其是酶活在同类产品中比较低的产品

言之有理
7楼2012-12-17 16:08:17
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