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通缉要饭

金虫 (著名写手)

[交流] cDNA文库构建过程中甲基化dCTP有何用?

朱玉贤《现在分子生物学》cDNA文库构建中(p157)说到,“在cDNA合成的过程中,应选用活性较高的反转录酶及甲基化dCTP”,不知道甲基化dCTP有何用?
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通缉要饭

金虫 (著名写手)


gyesang: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-09 16:36:33
哈哈,自己找到答案了!贴上来,或许有人会遇到和我一样的问题
在cDNA的第一链合成过程中,加人甲基化的脱氧胞苷酸(5-methyl dCTP)以取代正常的脱氧胞苷酸(dCTP),因此就可保护cDNA分子不被某些内切酶(如Xho I)切割。因此,在进行Xho I酶切时,只有接头引物上的非甲基化的Xho I酶切位点可以被切割,而cDNA分子中的甲基化的Xho I酶切位点则不被切割,从而保证了cDNA分子的完整性。
2楼2012-12-09 00:50:30
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