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num20062622

银虫 (正式写手)

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8楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-07 00:29:48
动力学曲线法。。。真是够专业的名字啊。
测这几个酶没必要这么麻烦,直接取几个时间点即可,例如1min 和 3 min,一般在这两个时间点酶活变化是一条直线。如果楼主不确信可以自己做一条曲线以确定时间点。...

是师姐告诉我的..
她做CAT的时候只用一个石英比色皿放在紫外分光光度计的最外边的那个杯槽里 设置3min  然后测定.

但我总觉得有点问题...
因为她没有调零 也没有对照...

所以我想问测CAT 跟POD的时候 是怎么进行测定的...
11楼2012-12-07 21:35:18
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num20062622

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 桐眠 at 2012-12-04 10:49:42
不需要对照,可以选择前几十秒比较好的曲线(所有样品时间最好能够统一),计算出斜率就行了


= =.
不需要对照怎么调零...
12楼2012-12-07 21:36:00
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by num20062622 at 2012-12-07 21:35:18
是师姐告诉我的..
她做CAT的时候只用一个石英比色皿放在紫外分光光度计的最外边的那个杯槽里 设置3min  然后测定.

但我总觉得有点问题...
因为她没有调零 也没有对照...

所以我想问测CAT 跟POD的时候 是怎 ...

同样的检测体系不加待测样品调零即可,我一般准备两个皿,另一个里加样品计时测定。你师姐那么做,相当于用空气或什么别的东西调零,但由于我们最后记录的是吸光度随时间变化值,所以只要数据变化处在仪器可信检测范围内,虽说操作不规范,但结果我觉得没什么问题。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
13楼2012-12-07 22:07:44
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num20062622

银虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by starseacow at 2012-12-07 22:07:44
同样的检测体系不加待测样品调零即可,我一般准备两个皿,另一个里加样品计时测定。你师姐那么做,相当于用空气或什么别的东西调零,但由于我们最后记录的是吸光度随时间变化值,所以只要数据变化处在仪器可信检测 ...

对啊. 我看两个师姐做的不一样..所以我才想问问大家是怎么测的...
我其中一个师姐做的时候是用两个比色皿 一个加混合体系不加酶液 一个加混合体系加酶液  ...
另外一个师姐做的时候是只用一个比色皿  没有调零
就是只用那以个比色皿加混合体系和加酶液的比色皿放在光度计测定的.
你说她相当于用空气调零?- 0-.我还是用跟你们一样两个比色皿测的方法测好了...
14楼2012-12-09 19:40:58
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poog502

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by num20062622 at 2012-12-07 21:32:44
CAT测出来就是负值.
因为CAT是测的是290nm的H2O2的吸光度
CAT催化双氧水变成水和氧气..
我想问的是 测CAT的时候是不是要两个石英比色杯。
一个是用缓冲液调零对照 一个是测定管. 然后设置190S进行时间扫描测定....

CAT是记录在240nm吸光值的变化情况,不需设置对照!
15楼2012-12-11 15:20:01
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dovina_liu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by poog502 at 2012-12-04 10:06:05
不用设置对照,选择曲线好的一段直接减法计算即可

请问一下计算出的斜率值是代表什么?
16楼2013-05-30 15:40:10
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boluodehai

新虫 (初入文坛)

弱弱的问一下 你的POD CAT测的结果怎么样 话说小弟也在测,给点经验啊亲
17楼2013-06-04 15:01:07
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num20062622

银虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by boluodehai at 2013-06-04 15:01:07
弱弱的问一下 你的POD CAT测的结果怎么样 话说小弟也在测,给点经验啊亲

话说我的样采的不好 好像酶活失活了所以没测好./
他们说CAT不是很好测.
酶液不要反复冻融就可以。
只要你的样采的没问题 一般都能测出来
要有信心做.
18楼2013-06-05 17:06:22
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