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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western转膜最近总是转过，大家帮忙分析下原因哈
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qiyaocheng at 2012-12-04 14:14:14
跟蛋白大小、膜网孔都有关系，，恒流还是恒压，找个表对应优化一下

关键是不管蛋白的大小都会转过，换了时间还是会转过，是10v转的
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11楼2012-12-04 21:30:46
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-12-04 21:28:49
湿法呀，哎，这个闹心的，实验室一堆人的实验图片都很不好看呢...

湿法电压还是电流是10？感觉很小哦，只转20分钟可能没转好。我做湿法用400mA转1.5h的。
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12楼2012-12-05 07:53:21
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加预染Marker试一下效果，
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13楼2012-12-05 12:25:19
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yojoy123

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换半干转试试，呵呵
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14楼2012-12-05 12:35:10
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by jl860822 at 2012-12-05 12:25:19
加预染Marker试一下效果，

我们实验室一直都是用的预染的marker呀。。。
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15楼2012-12-05 16:00:28
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by yojoy123 at 2012-12-05 12:35:10
换半干转试试，呵呵

嗯嗯，没做过呢，试下看看
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16楼2012-12-05 16:00:40
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一，要确定你的蛋白分子量与膜是不是相符？
第二，转膜的时候电压是不是过大？
第三，湿转的缓冲液是否恰当？强度过大会造成这种状况的！
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人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
17楼2012-12-05 16:25:04
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-05 07:53:21
湿法电压还是电流是10？感觉很小哦，只转20分钟可能没转好。我做湿法用400mA转1.5h的。...

电压是10v啊。。。你转那么久的？
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18楼2012-12-05 16:27:15
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 396101466 at 2012-12-05 16:25:04
第一，要确定你的蛋白分子量与膜是不是相符？
第二，转膜的时候电压是不是过大？
第三，湿转的缓冲液是否恰当？强度过大会造成这种状况的！

嗯嗯，我再检查检查看看
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19楼2012-12-05 16:28:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
18楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-12-05 16:27:15
电压是10v啊。。。你转那么久的？...

电压是10V，电流是多少呢？感觉你的体系很不一样，我做的时候电压在70-100V呢。有时候也只转1h，不过可以看到预染的marker分子量大的条带有残留。
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20楼2012-12-06 08:36:57
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