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山水506

铜虫 (初入文坛)

[求助] U87细胞的传代

各位细胞达人,有谁养过U87细胞的吗?我养U87细胞事,为什么随着传代次数的增加,细胞状态越来越不好呢?有时候传的细胞还不贴壁。。。
PS:U87细胞容易消化吗?我一般是等到瓶子周围的细胞有向下流的时候再终止消化,这种时候消化过度了吗?    谢谢了~~
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wo258741ni

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 山水506 at 2012-12-08 22:21:20
养时间长了是会有聚堆现象,这是正常现象。U87的贴壁性能还是挺好的,不过我不知道为什么,也是细胞状态越养越不好...

我想请问一下,我也是养U87细胞,养久了之后,就感觉细胞贴壁之后,轻微的碰撞也会有很多细胞浮上来,其他性状都还算正常的,就是贴壁性越来越差,是怎么回事啊?
8楼2014-05-13 09:47:57
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
U87细胞生长到过分密集的情况下会形成一簇一簇的,但是贴壁能力还是不错的。你消化细胞的时候注意在显微镜下面观察,等到细胞质回缩就可以终止消化了。另外,你要注意看看你的细胞有没有支原体之类的污染。可以用细胞核荧光染料染色在荧光显微镜下观察看看除了细胞核之外,细胞周围有没有荧光颗粒出现。

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实验,实验,还是实验!
2楼2012-12-05 07:32:40
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山水506

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ujsyangyong at 2012-12-05 07:32:40
U87细胞生长到过分密集的情况下会形成一簇一簇的,但是贴壁能力还是不错的。你消化细胞的时候注意在显微镜下面观察,等到细胞质回缩就可以终止消化了。另外,你要注意看看你的细胞有没有支原体之类的污染。可以用细 ...

细胞质回缩?你能具体说一下是到哪种程度吗?是细胞刚变圆尚未聚集成一块一块的?还是细胞聚集成一块一块的但肉眼尚未看到有细胞往下流,还是肉眼已经能看到有细胞刚往下流时?谢谢了~~
3楼2012-12-05 19:27:01
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
山水506: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-06 12:05:31
看不见正常生长时铺展开的细胞形态,可以说是聚集成一块一块的尚未往下流吧,然后你加入培养液终止消化,轻轻吹打就全都下来啦。
实验,实验,还是实验!
4楼2012-12-06 01:58:12
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