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追梦的人1987

金虫 (小有名气)

[求助] 求助

有个问题请教一下，我现在有一个原株，两个突变株，其中，一个突变株某种物质的表达量上升，某种表达量下降，我现在通过双向来看相关蛋白双向来看表达量得上调或下降，来克隆与能高量表达该物质的基因，这样的话，我在筛选蛋白双向的的点时，该如何做呢
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1楼 2012-12-02 17:48:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
追梦的人1987: 金币+5, ★有帮助 2012-12-03 10:59:21
把对照、上升、下降的样品都跑双向，然后对比三个样品，选出原株表达量在中间，两个突变株一个上升，一个下调的点，挖点打质谱。
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追梦的人1987
2楼2012-12-03 04:00:43
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-03 04:00:43
把对照、上升、下降的样品都跑双向，然后对比三个样品，选出原株表达量在中间，两个突变株一个上升，一个下调的点，挖点打质谱。

我还想问一下，因为经费问题，我们一个样品只做了两个重复，这样的话，有的组内差距较大，我想的就是组内差距在多少之内是可以接受的呢，（无法做三个重复啊，没法做统计学分析）
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3楼2012-12-03 11:01:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2012-12-03 11:01:05
我还想问一下，因为经费问题，我们一个样品只做了两个重复，这样的话，有的组内差距较大，我想的就是组内差距在多少之内是可以接受的呢，（无法做三个重复啊，没法做统计学分析）...

通常做定量的话至少要有三个重复。一般是至少跑4个胶，取重复性好的三个。差距多少proteomics的文献上都有要求。总之，尽量严格控制实验条件，重复数据平行才能说明问题。
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4楼2012-12-03 12:21:00
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