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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Sf-9昆虫细胞培养
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)

[求助] Sf-9昆虫细胞培养

请问哪位虫友养过Sf-9或Hi-5昆虫细胞表达蛋白的吗？你们用的是什么培养箱（厂家，型号）？你们是悬浮培养还是静态培养？有什么需要注意的地方
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1楼 2012-12-02 13:48:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mier.

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-02 19:44:18
zhangdapeng: 金币+10, ★有帮助, 谢谢！我问过别的研究所，但是我询问了价钱要一万多欧元，老师觉得太贵了， 2012-12-02 22:44:21
培养箱可以调节温度的，用grace培养基，我们用的是gibco的，培养箱的温度要调节到20°，悬浮培养。
你可以查查文献，或者百度什么的多看看，问问其他师哥师姐的。祝你成功哦！
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怀有希望就是好事，但要做好最坏打算！
2楼2012-12-02 17:14:22
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wzysllm

木虫 (小有名气)
TC-100培养基是Applichem 公司的
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6楼2012-12-05 10:04:04
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普通回帖

keennes

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-12-03 04:51:50
zhangdapeng: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2012-12-04 21:58:10
我是恒定28度培养，细胞均贴壁生长，不需要二氧化碳，gibco的grace培养基，10%新西兰进口血清，无需灭活，培养时将培养瓶盖稍微拧紧些。生长状态很好，差不多两三天传代一次。
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独上高楼，望尽天涯路……
3楼2012-12-03 00:39:35
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resurgam

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangdapeng: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢！你们使用什么摇床来培养？我想买Infors的，但老板显贵了 2012-12-04 22:00:05
gibco的SFX培养基，无需血清，要避光。悬浮培养比贴壁培养长得快且长得好，没什么太多需要注意的，就是温度控制在27-28度，无需co2
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4楼2012-12-03 05:53:01
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wzysllm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangdapeng: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！能否提供型号？是否可以摇？我想悬浮培养 2012-12-06 12:39:48
我们用的是三洋的二氧化碳生化培养箱，但sf9不需要通CO2，26度贴壁培养就可以。买这个培养箱的话以后养其他细胞可能也能用上，但价格可能不便宜。
由于无需同CO2，所以用的细胞培养瓶Thermo公司是那种密封瓶口的，不是一般带透气功能的培养瓶。
培养基用过Gibco的grace公司培养基和Aoolichem公司改良后的TC-100昆虫培养基。双抗和FBS就不用多说了。
如果需要大批量养细胞的话，可以用那种转瓶机来养，我们现在用的一次可以加入2-3L的细胞培养基，无论贴壁还是悬浮都长的很好。
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5楼2012-12-05 10:01:54
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wzysllm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢补充 2012-12-10 08:12:09
引用回帖:
5楼: Originally posted by wzysllm at 2012-12-05 10:01:54
我们用的是三洋的二氧化碳生化培养箱，但sf9不需要通CO2，26度贴壁培养就可以。买这个培养箱的话以后养其他细胞可能也能用上，但价格可能不便宜。
由于无需同CO2，所以用的细胞培养瓶Thermo公司是那种密封瓶口的， ...

悬浮培养：瑞士阿道夫可耐（Kuhner）  SM1034
贴壁培养：日本三洋（SANYO）MCO-20AIC
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7楼2012-12-06 17:19:42
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by resurgam at 2012-12-03 05:53:01
gibco的SFX培养基，无需血清，要避光。悬浮培养比贴壁培养长得快且长得好，没什么太多需要注意的，就是温度控制在27-28度，无需co2

请问能否告诉我一下你们使用的培养箱吗？
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8楼2012-12-07 17:40:12
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wzysllm at 2012-12-05 10:01:54
我们用的是三洋的二氧化碳生化培养箱，但sf9不需要通CO2，26度贴壁培养就可以。买这个培养箱的话以后养其他细胞可能也能用上，但价格可能不便宜。
由于无需同CO2，所以用的细胞培养瓶Thermo公司是那种密封瓶口的， ...

请问能否告诉我一下你们使用的培养箱的型号吗？
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9楼2012-12-07 17:40:49
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resurgam

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2012-12-10 08:13:04
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhangdapeng at 2012-12-07 17:40:12
请问能否告诉我一下你们使用的培养箱吗？...

培养箱是thermo的，普通的细胞培养箱，只是不通co2，培养温度也设定在27度。
悬浮培养直接扔摇床，摇床是可以控温的，三角瓶外包一层锡箔纸就能避光了，细胞密度以4x10e6/ml为佳，不要超过6x10e6/ml，生长非常快，细胞状态也挺好，至少比培养箱里长得好
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10楼2012-12-07 19:48:38
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