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zhangdapeng

木虫 (著名写手)

[求助] Sf-9昆虫细胞培养

请问哪位虫友养过Sf-9或Hi-5昆虫细胞表达蛋白的吗?你们用的是什么培养箱(厂家,型号)?你们是悬浮培养还是静态培养?有什么需要注意的地方
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mier.

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-02 19:44:18
zhangdapeng: 金币+10, 有帮助, 谢谢!我问过别的研究所,但是我询问了价钱要一万多欧元,老师觉得太贵了, 2012-12-02 22:44:21
培养箱可以调节温度的,用grace培养基,我们用的是gibco的,培养箱的温度要调节到20°,悬浮培养。
你可以查查文献,或者百度什么的多看看,问问其他师哥师姐的。祝你成功哦!
怀有希望就是好事,但要做好最坏打算!
2楼2012-12-02 17:14:22
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wzysllm

木虫 (小有名气)

TC-100培养基是Applichem 公司的
6楼2012-12-05 10:04:04
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普通回帖

keennes

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-12-03 04:51:50
zhangdapeng: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢! 2012-12-04 21:58:10
我是恒定28度培养,细胞均贴壁生长,不需要二氧化碳,gibco的grace培养基,10%新西兰进口血清,无需灭活,培养时将培养瓶盖稍微拧紧些。生长状态很好,差不多两三天传代一次。
独上高楼,望尽天涯路……
3楼2012-12-03 00:39:35
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resurgam

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangdapeng: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢!你们使用什么摇床来培养?我想买Infors的,但老板显贵了 2012-12-04 22:00:05
gibco的SFX培养基,无需血清,要避光。悬浮培养比贴壁培养长得快且长得好,没什么太多需要注意的,就是温度控制在27-28度,无需co2
4楼2012-12-03 05:53:01
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wzysllm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangdapeng: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢!能否提供型号?是否可以摇?我想悬浮培养 2012-12-06 12:39:48
我们用的是三洋的二氧化碳生化培养箱,但sf9不需要通CO2,26度贴壁培养就可以。买这个培养箱的话以后养其他细胞可能也能用上,但价格可能不便宜。
由于无需同CO2,所以用的细胞培养瓶Thermo公司是那种密封瓶口的,不是一般带透气功能的培养瓶。
培养基用过Gibco的grace公司培养基和Aoolichem公司改良后的TC-100昆虫培养基。双抗和FBS就不用多说了。
如果需要大批量养细胞的话,可以用那种转瓶机来养,我们现在用的一次可以加入2-3L的细胞培养基,无论贴壁还是悬浮都长的很好。
5楼2012-12-05 10:01:54
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wzysllm

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢补充 2012-12-10 08:12:09
引用回帖:
5楼: Originally posted by wzysllm at 2012-12-05 10:01:54
我们用的是三洋的二氧化碳生化培养箱,但sf9不需要通CO2,26度贴壁培养就可以。买这个培养箱的话以后养其他细胞可能也能用上,但价格可能不便宜。
由于无需同CO2,所以用的细胞培养瓶Thermo公司是那种密封瓶口的, ...

悬浮培养:瑞士阿道夫可耐(Kuhner)  SM1034
贴壁培养:日本三洋(SANYO)MCO-20AIC
7楼2012-12-06 17:19:42
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by resurgam at 2012-12-03 05:53:01
gibco的SFX培养基,无需血清,要避光。悬浮培养比贴壁培养长得快且长得好,没什么太多需要注意的,就是温度控制在27-28度,无需co2

请问能否告诉我一下你们使用的培养箱吗?
8楼2012-12-07 17:40:12
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wzysllm at 2012-12-05 10:01:54
我们用的是三洋的二氧化碳生化培养箱,但sf9不需要通CO2,26度贴壁培养就可以。买这个培养箱的话以后养其他细胞可能也能用上,但价格可能不便宜。
由于无需同CO2,所以用的细胞培养瓶Thermo公司是那种密封瓶口的, ...

请问能否告诉我一下你们使用的培养箱的型号吗?
9楼2012-12-07 17:40:49
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resurgam

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2012-12-10 08:13:04
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhangdapeng at 2012-12-07 17:40:12
请问能否告诉我一下你们使用的培养箱吗?...

培养箱是thermo的,普通的细胞培养箱,只是不通co2,培养温度也设定在27度。
悬浮培养直接扔摇床,摇床是可以控温的,三角瓶外包一层锡箔纸就能避光了,细胞密度以4x10e6/ml为佳,不要超过6x10e6/ml,生长非常快,细胞状态也挺好,至少比培养箱里长得好
10楼2012-12-07 19:48:38
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