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glc880824

金虫 (小有名气)

[交流] 沉淀透析 已有4人参与

我用各种方法沉淀蛋白,透析后总是有少许沉淀出现,调节pH后也溶解不了,怎么可以让这些沉淀溶解?谢谢
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)


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你不想要蛋白吧?
调PH沉淀的是确定是蛋白吗?
想溶解的办法有很多,比如用变性剂溶解(脲或盐酸胍,如果还是溶解不好,可以加超声助溶)。
2楼2012-11-30 08:34:49
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兰草新

银虫 (初入文坛)


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好像楼主的意思是透析置换条件沉淀,然后透析置换条件复溶?然后没有都复溶?是这样么。。。能具体说下不?
3楼2012-11-30 15:11:22
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glc880824

金虫 (小有名气)

就是透析后,透析袋里有不溶物,我想知道怎么把这不溶物溶解?
4楼2012-11-30 22:19:06
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glc880824

金虫 (小有名气)

用硫酸铵沉淀后的物质用蒸馏水溶解了,然后用蒸馏水透析,可是透析完以后,透析袋里有白色不溶物,我想知道这是什么原因?怎么让这些不溶物溶解?
5楼2012-12-02 18:08:39
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qianshengguo

铜虫 (小有名气)


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5楼: Originally posted by glc880824 at 2012-12-02 18:08:39
用硫酸铵沉淀后的物质用蒸馏水溶解了,然后用蒸馏水透析,可是透析完以后,透析袋里有白色不溶物,我想知道这是什么原因?怎么让这些不溶物溶解?

白色不溶物应该是蛋白质,这是蛋白不能适应透析buffer,剧烈作用下产生的,是絮状的。可以考虑用肌氨酸钠等体系的buffer进行复融(当然你也可以用其他的)
6楼2012-12-04 13:57:37
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蝴蝶110

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by glc880824 at 2012-12-02 18:08:39
用硫酸铵沉淀后的物质用蒸馏水溶解了,然后用蒸馏水透析,可是透析完以后,透析袋里有白色不溶物,我想知道这是什么原因?怎么让这些不溶物溶解?

楼主,我跟你遇到同样的问题了,弱弱问下楼主解决了这个问题么?
7楼2013-09-03 21:44:26
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