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linjinbin10

金虫 (正式写手)


[交流] 超声波破壁温度一定要冰浴吗?

小弟在做超声波破壁,破壁条件是工业生产用的破壁机720W,3min,共破36min,我要的是细胞壁的碎片,不需要考虑其它,想咨询下,我需要做破壁温度的影响吗??直接条件是冰浴?
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flyliuyuan

新虫 (初入文坛)



linjinbin10(金币+1): 谢谢参与
不管你要的是细胞表达的蛋白还是细胞碎片,都必须要并与,这样才能避免由于超声过程中产生的热对蛋白活性的影响,如果温度过高,蛋白往往就碳化了,能很明显的看到管底有黑色的沉淀,这样的话损失就太多了.
5楼2012-12-03 16:01:22
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★ ★ ★
linjinbin10(金币+1): 谢谢参与
laozuzunzhe: 金币+2, good! 2012-11-29 17:36:05
冰浴是防止破胞的时候产生高温破坏活性物质的活性,看你的实验目的了。
不过一般都会冰浴,即使不担心活性的问题,温度太高也会影响机器工作的。
2楼2012-11-29 17:02:52
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zhanggong999

新虫 (初入文坛)



linjinbin10(金币+1): 谢谢参与
是的,因为超声会产生高温。一般冰浴中破壁可尽量保持可溶性的目的蛋白不失活
3楼2012-11-29 18:09:15
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)



linjinbin10(金币+1): 谢谢参与
最好用冰浴,虽然你要的是细胞壁碎片,但是温度高了往往会促进各种反应,碎片要是参加了什么反应也不是什么好事儿~
楼上说得对,就算你不在乎样品,至少这样对机器也好……
4楼2012-11-29 20:46:04
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