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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 请做过活性氧检测实验的战友们前来指导，我打算采用流式细胞仪检测DCF
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2011加油

银虫 (正式写手)

[求助] 请做过活性氧检测实验的战友们前来指导，我打算采用流式细胞仪检测DCF 已有1人参与

大家好，最近打算做一株贴壁细胞的活性氧检测实验。我想请问，采用流式细胞仪检测时，用不用额外多设置一个阴性对照组细胞，不用加DCFH-DA探针（或者将阴性对照组分半，一半待加探针，一半不加探针），而只需加入PBS溶液，作为荧光调节补偿，圈定分析的细胞群。或者这个额外组可以不做。其余给药组和阴性对照组都用加DCFH-DA探针，37度孵育20分钟后，清洗3遍，各组加入1mlPBS溶液，待上机检测。

另外碧云天的活性氧试剂盒中有一个rosup用于做阳性对照的，这个组能否不做？

求正解，请做过该实验的战友更要多多指导啊 ！！！
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1楼 2012-11-27 18:38:59
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2011加油

银虫 (正式写手)
2楼2012-11-27 19:08:46
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2011加油

银虫 (正式写手)
3楼2012-11-27 20:27:21
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2011加油

银虫 (正式写手)
4楼2012-11-28 18:47:20
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IMJane

新虫 (初入文坛)
顶一个~
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5楼2012-11-29 01:12:02
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hallen6891

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
2011加油: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-11-30 10:01:04
2011加油: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-11-30 10:01:32
阴性对照对照是要做的，就像你说的，这是用来圈定你的主群细胞以及荧光调节，确定阳性荧光值，另外，阳性对照是用来确定你的操作没有问题，能够确定出阳性值的对照。
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生活要好好过！
6楼2012-11-29 09:39:56
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2011加油

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hallen6891 at 2012-11-29 09:39:56
阴性对照对照是要做的，就像你说的，这是用来圈定你的主群细胞以及荧光调节，确定阳性荧光值，另外，阳性对照是用来确定你的操作没有问题，能够确定出阳性值的对照。

真的很感谢你来应助。我想知道，阴性对照组是不用加探针的还是需要分半，一半加探针，一半不加探针？？？这个问题比较重要，我很想了解清楚再做实验。另外，对实验方法有把握的话，阳性对照组可以选择不做是不？还请不吝赐教
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每天都是新开始，2011，要好好努力！
7楼2012-11-29 15:25:47
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hallen6891

新虫 (小有名气)
我是两个都做了的  不加探针的用来圈门来着
至于阳性对照 我后期就没有再做了
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生活要好好过！
8楼2012-11-30 09:18:31
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2011加油

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hallen6891 at 2012-11-30 09:18:31
我是两个都做了的  不加探针的用来圈门来着
至于阳性对照 我后期就没有再做了

多谢了。我明白了。就是用阴性对照分两份，一份不加探针，只加PBS溶液。另一部分要加探针，看看阴性对照的ROS水平。阳性对照貌似可以不做。
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每天都是新开始，2011，要好好努力！
9楼2012-11-30 09:59:12
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秋毛毛

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你好，我也是用的这个试剂盒，也打算用流式细胞仪检测，我只是检测不同细胞ROS的水平，是不是就不用做阴性对照了？
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10楼2012-11-30 14:15:35
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