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aa5288

铜虫 (小有名气)

[求助] 提取DNA

大家好,我用试剂盒提取干种子壳DNA,跑0.8%的琼脂糖凝胶电泳,没有条带出现,但是将提取出的DNA先PCR,在跑1.5%的琼脂糖凝胶电泳,有明显的条带出现,请问这是什么原因?是提取的DNA量太少吗?
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浪费了那些年,那些眼泪,你应该成为更好的自己
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pacer02

禁虫 (初入文坛)

aa5288: 回帖置顶 2012-11-30 14:53:40
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4楼2012-11-30 07:16:43
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
真核生物PCR模板的DNA量在10-100ng就可以得到非常好的扩增条带。不知道你的样品是否去除了RNA,如果直接跑电泳,大致需要1ug才可以看到比较好的条带。如果有条件的话,你可以用nanodrop定一下量。
2楼2012-11-26 05:31:40
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xstarsky

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能抽提的DNA检测时浓度低,建议用分光光度计测一下浓度以及纯度
3楼2012-11-27 13:39:20
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个很正常,一般是提取的DNA的含量比较少,琼脂糖电泳的检测精度就是这样!
宠辱不惊,看庭前花开花落;去留无意,望天上云卷云舒。
5楼2013-01-21 16:36:12
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zhaobo816

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

只能说明你提取的DNA浓度不够高,你可以不稀释,直接用来扩增,可以扩出结果的。我每次都是这么做的,出来的条带还可够亮,我是做测序,就拿去直接送测了,结果也还可以。
6楼2013-03-02 16:18:43
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