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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » MCF-7培养并铺了好几个孔板都长不均匀，怎么样才能均匀啊，急急急！！！
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亚玄轩

铜虫 (小有名气)

[求助] MCF-7培养并铺了好几个孔板都长不均匀，怎么样才能均匀啊，急急急！！！

看了很多帖子，自己也尝试了些，就是长不均匀啊，后天就要培养了，然后做转染，怕怕怕，求高人解答！
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1楼 2012-11-23 17:29:36
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酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-24 13:48:00
亚玄轩: 金币+2, ★★★很有帮助, 很好 2012-11-25 23:53:59
你可以在50ml离心管中将细胞稀释到你要的细胞密度，充分混匀，然后用吸管将合适体积的细胞悬液直接转移到6孔板或24孔板，加入细胞悬液后，不要再晃动混匀，直接平置在培养箱，贴壁后很均匀。
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亚玄轩
2楼2012-11-23 19:33:24
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个问题很简单。。。只需要前拍拍。。后拍拍。。左拍拍。。右拍拍。。保证你均匀。。屡试不爽噢。。
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keepon
3楼2012-11-24 10:06:05
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linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 欢迎交流经验 2012-11-24 13:48:21
亚玄轩: 金币+2, ★★★很有帮助, 最大量减少系统误差啊，十字交叉很好用，谢谢了。 2012-11-25 23:55:27
我操作时主要是3个步骤，以铺24孔盘为例：
1. 将细胞稀释成目的密度的悬液，然后分为4份，一份足够用来铺6个孔；
2. 铺板，一份对应6个孔，每铺一个孔前小心混匀，以保证细胞数量一致；
3. 铺好板后，前后左右摇匀，然后轻拿轻放至培养箱中。
希望对楼主有帮助。
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小兵一个
4楼2012-11-24 11:01:06
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亚玄轩

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-11-23 19:33:24
你可以在50ml离心管中将细胞稀释到你要的细胞密度，充分混匀，然后用吸管将合适体积的细胞悬液直接转移到6孔板或24孔板，加入细胞悬液后，不要再晃动混匀，直接平置在培养箱，贴壁后很均匀。

谢谢了，我是师姐带我做的，就是先加培养基，然后加细胞悬液，吹打，十字交叉，晚上看了还行。前面师兄用的你的方法，后面又吹打了一次，一点不均匀，就没有采纳。谢谢了
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5楼2012-11-25 23:52:45
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亚玄轩

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-24 10:06:05
这个问题很简单。。。只需要前拍拍。。后拍拍。。左拍拍。。右拍拍。。保证你均匀。。屡试不爽噢。。

拍了靠重心全部到中心了，很爽哦
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6楼2012-11-25 23:53:14
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 亚玄轩 at 2012-11-25 23:53:14
拍了靠重心全部到中心了，很爽哦...

啥意思呢？
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keepon
7楼2012-11-26 09:29:01
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亚玄轩

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-26 09:29:01
啥意思呢？...

你拍了不就靠震动像中心移动趋势，我不太明白你的意思，望解答，谢谢
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8楼2012-11-26 15:21:57
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 亚玄轩 at 2012-11-26 15:21:57
你拍了不就靠震动像中心移动趋势，我不太明白你的意思，望解答，谢谢...

不信你就试试。。。拍的时候温柔点。。。
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keepon
9楼2012-11-27 10:48:25
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亚玄轩

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-27 10:48:25
不信你就试试。。。拍的时候温柔点。。。...

OK,我试试，反正现在什么都在摸索
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10楼2012-11-27 16:55:33
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