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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求α-乙酰乳酸的检测方法
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lcx2006000

新虫 (小有名气)

[求助] 求α-乙酰乳酸的检测方法

α-乙酰乳酸的检测方法 在细胞内被酶催化成乙偶姻/3羟基丁酮，目前我把这个酶敲除了，想检测这个酶的底物有没有积累。
找不到检测方法啊……求大仙帮忙啊……
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1楼 2012-11-22 10:55:28
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-01 17:14:49
中间代谢物用HPLC 就可以吧，买个标准品，跟他对比。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2012-11-22 18:46:07
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lcx2006000

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaodahe at 2012-11-22 18:46:07
中间代谢物用HPLC 就可以吧，买个标准品，跟他对比。

这个中间产物是不稳定的，似乎没有标品卖
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3楼2012-12-01 10:32:56
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by lcx2006000 at 2012-12-01 10:32:56
这个中间产物是不稳定的，似乎没有标品卖...

那可能比较麻烦，要是比较容易降解，别的实验也难设计。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2012-12-01 12:36:44
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na466433306

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

lz最后用的什么方法？我也要测，准备用硫酸催化它生成3-羟基丁酮，再用肌酸比色法测定3-羟基丁酮的含量
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5楼2013-04-24 16:47:37
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lcx2006000

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by na466433306 at 2013-04-24 16:47:37
lz最后用的什么方法？我也要测，准备用硫酸催化它生成3-羟基丁酮，再用肌酸比色法测定3-羟基丁酮的含量

没有检测，文献也没有报道检测α-乙酰乳酸的方法，比色法可信度怎么样啊？
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6楼2013-04-25 20:40:24
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na466433306

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lcx2006000 at 2013-04-25 20:40:24
没有检测，文献也没有报道检测α-乙酰乳酸的方法，比色法可信度怎么样啊？...

我今天刚刚测了3-羟基丁酮的标准曲线，还是挺稳定的，想想应该没什么问题
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7楼2013-04-25 22:14:32
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hqsinberg

木虫 (著名写手)

清风小木虫
引用回帖:
7楼: Originally posted by na466433306 at 2013-04-25 22:14:32
我今天刚刚测了3-羟基丁酮的标准曲线，还是挺稳定的，想想应该没什么问题...

看到你做了3-羟基丁酮的标准曲线，我也需要这方面实验，来请教。1、生成的显色反应是在30还是60摄氏度，多长时间；2、生成颜色是在密封的具塞试管（3-羟基丁酮易挥发）还是在敞口的试管；3、颜色稳定吗？比如几分钟内吸光值几乎不变；非常感谢，忘不吝赐教
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8楼2013-11-16 17:25:56
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hqsinberg

木虫 (著名写手)

清风小木虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by na466433306 at 2013-04-25 22:14:32
我今天刚刚测了3-羟基丁酮的标准曲线，还是挺稳定的，想想应该没什么问题...

看到你做了3-羟基丁酮的标准曲线，我也需要这方面实验，向高手和前辈请教。1、生成的显色反应是在30还是60摄氏度，反应时间？；2、生成颜色是在密封的具塞试管还是在敞口的试管：不敞口怕试管里面的氧气不够，反应不彻底，敞口试管怕3-羟基丁酮易挥发；3、颜色稳定吗？比如几分钟内吸光值几乎不变；非常感谢，忘不吝赐教
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9楼2013-11-16 17:28:07
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na466433306

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by hqsinberg at 2013-11-16 17:28:07
看到你做了3-羟基丁酮的标准曲线，我也需要这方面实验，向高手和前辈请教。1、生成的显色反应是在30还是60摄氏度，反应时间？；2、生成颜色是在密封的具塞试管还是在敞口的试管：不敞口怕试管里面的氧气不够，反应 ...

我可不是前辈呢，哈哈，我是小卒。
1、显色反应是在30度，1h
2、我当时用的是敞口的试管，倒是没有考虑那么多，但是结果还是很明显的，我想敞口的应该是可以的
3、实验做比较久了有点忘了，颜色时间长了肯定会变，但是几分钟应该是没有问题的，这个你也可以实验做了之后自己测定一下是吧
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10楼2013-11-16 22:37:09
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