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a_horse

银虫 (小有名气)

[求助] 关于生物样品固相萃取的几个疑问

1,上样之前血清需要稀释吗?
2,如果用甲醇淋洗,蛋白会不会沉淀在柱子里
3,怎么收集洗脱液,必须用固相萃取的装置吗?
4,上样浓度怎么定,我的柱子上是50mg/1.5ml
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白水6177

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-11-19 16:59:29
1,不要稀释
2,会
3,收集洗脱液直接接在下面即可,不必要非得用固相萃取的装置,但是仅限于少量的样品
4,上样浓度根据药物化学性质
2楼2012-11-19 16:43:49
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第二个问题  在甲醇洗脱之前  会有一步经水或者低浓度甲醇淋洗  洗掉蛋白等杂质  最后才是甲醇或者含一点甲酸的甲醇水溶液洗脱 收集 挥干 复溶 测试
3楼2012-11-19 21:07:54
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a_horse

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 白水6177 at 2012-11-19 16:43:49
1,不要稀释
2,会
3,收集洗脱液直接接在下面即可,不必要非得用固相萃取的装置,但是仅限于少量的样品
4,上样浓度根据药物化学性质

收集洗脱液仅仅靠重力就可以吗?
4楼2012-11-20 09:19:12
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bigpalewolf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

血清得先做一下蛋白沉淀吧。。。如果用有机溶剂陈,就得挥干,然后用水相复容,然后上柱。 另外还可以选择10%三氯乙酸沉淀蛋白。
5楼2012-11-27 05:06:40
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