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[交流] 求助:如何进行生物碱的分离

最近老板把生物碱的分离的任务交给了我,
在分离极性比较大的部分时需要注意些什么?
但以前没有做过,请各位高手给指教指教!
万分感激!

[ Last edited by vhansen on 2007-7-19 at 14:47 ]

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1楼 2007-07-05 19:49:47

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FRIEDFISH

铜虫 (小有名气)

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生物碱的色谱分离法

★ ★
karl2100(金币+2):谢谢提供！

我这有关于生物碱的色谱分离方法，
希望对LZ有帮助！

3 生物碱分离方法的研究新进展
众所周知生物碱的分离方法的确很多，既有经典的分离方法，如溶剂萃取法、蒸馏法、沉淀法、盐析法、结晶法、膜渗透升华法等，也有较为现代、先进的分离方法，如色谱分离法。
3．1 硅胶柱色谱分离法  主要是利用二氧化硅作为填料，是较为常用的柱色谱分离方法。硅胶是中性无色颗粒，其性能稳定。硅胶层析柱适用范围广，既能用于非极性生物碱也能用于极性生物碱，且成本低，操作方便，是常见的生物碱的分离方法.比如董新荣等利用GF254硅胶自制的硅胶柱，对北美黄连中的主要生物碱进行分离，可以得到99．5％的北美黄连碱。
3． Al2O3 柱色谱分离法  以Al2O3作为填料的层析分离法，适合于酸性大、活化温度较高的生物碱的分离。比如采用Al2O3层析方法正向分离非酚性粉防己碱与粉防己若林碱J，其Rf值适中，展开后放置10 rain以显色剂喷湿润效果为最好且稳定，可得到较好的效果。这种柱色谱分离法也是较为常用的生物碱分离的方法之一。这是由于许多生物碱极性较小，氧化铝对它们吸附较小，而杂质常被吸附。
3．3 大孔树脂分离法  大孔树脂是一类有机高聚物吸附剂，具有大孔网状结构和较大的比表面积，可通过物理吸附从水溶液(或其他溶液)中选择性的吸附有机物。近年来，大孔树脂在中药成分(如生物碱等)精制纯化等领域中应用越来越广泛。用大孔树脂分离提取生物碱，已有较多的研究。例如Miue 划应用Amberlite XAD一4大孔树脂自吗啡溶液中提取吗啡；Payne考察了Am-berliteXAD一4，XAD一7大孔树脂对吲哚生物碱的吸附作用；Robert则应用Amberlite XAD一4，XAD一7大孔树脂在罂粟细胞培养中吸附血根碱；Hiroyuki利用Ambedite XAD一4，XAD一7大孔树脂在阿拉伯咖啡细胞培养中富集咖啡因；刘俊红等利用D一101，DA一201，WID-II三种不同的大孔树脂分离提取延胡索生物碱。这些研究表明，大孔吸附树脂对于生物碱具有良好的吸附效能，与传统的分离方法相比，具有工艺简单，能耗较少，成品体积小，产品质量稳定且具有良好的生理活性等特点。
3．4 离子交换树脂分离法  离子交换树脂对吸附质的作用主要是通过静电引力和范德华力达到分离纯化化合物的目的。随着人们对生物碱的认识和了解，离子交换树脂已应用于生物碱的分离提取中。离子交换技术设备简单，操作方便，生产周期短、能源省、成本低、产品纯度高、不吸潮、不加辅料就可以成型等特点。而传统的水煮法和水醇法提取分离得到的制剂总是又黑、又大、又粗，使用极不方便；有机溶剂萃取方法，溶剂用量大，环境污染严重。因而离子交换树脂法在生物碱的提取和分离的研究与生产中的应用日益广泛。
3．5 高速逆流色谱分离法  高速逆流色谱分离法(hight speed countercur．rent chromatography，简称HSCCC)是一种新的分离技术，它对生物碱的分离和制备具有很大的优势，特别是对进样量较大的样品具有独特的优点，其应用前景越来越引人注目。高速逆流色谱分离法具有两大突出优点：(1)线圈中固定相不需要载体，因而清除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象；(2)特别运用于制备性的分离，每次进样体积较大，进样量也较多。目前，运用高速逆流色谱分离法来分离提纯生物碱的实例也有不少，比如袁黎明等利用高速逆流色谱分离苦参中的生物碱，分离效果良好；宇敏等人采用高速逆流色谱对红河青叶胆中总生物碱进行分离，一次进样可达20嘴，并能得到3种生物碱。