| 查看: 1148 | 回复: 2 | ||
[求助]
硅胶柱层析
|
|
各位大侠，小弟最近一直在用硅胶柱分离树脂类的物质，但有几个问题一直困扰着我，望神人多多指点。问题如下: 1.湿法和干法装柱我都试过，但我发现干法装柱的时候硅胶都是发白的，而湿法装柱硅胶显示凝胶状，倒出时也是如此，溶剂都是石油醚，我怀疑干法装柱溶剂无法到达柱子的每一个角落，请问干法装柱到底可行不可行，有没有用干法分离好的案列？ 2.上样时，干法上样老是出现断层，即样品和硅胶分离，我觉得这样的溶剂会直接从缝隙流下，加大溶剂极性时极性小的汇合极性大的一块出来，但是湿法溶解度不好，这该怎样解决？ 3.样品溶解时的问题，湿法上样的话究竟应该选用什么样的溶剂。假如我用洗脱剂石油醚乙酸乙酯，50%的可以溶解样品，我该从什么比列开始呢 4.梯度洗脱的话每一个比列该冲到什么程度呢，以前我是冲到无色发现费时费力，变换太快又分离不好 5.石油醚乙酸乙酯能不能用密度计回收，我以前回收了，但是总不踏实，石油醚60——90是沸程，回收后的石油醚就不是回收前的石油醚了，还能用吗 这些问题困扰我多日了，那位大侠能提供帮助，小弟将感激不尽 。 |
回复此楼
genwy
xiaofei0124
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 553.6
- 散金: 5
- 帖子: 158
- 在线: 39.7小时
- 虫号: 1350713
- 注册: 2011-07-19
- 性别: GG
- 专业: 天然有机化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
1.最常用的还是干法装柱子，溶剂对硅胶的溶解性不同，情况就不一样，没有什么影响，关键在于柱子装的好坏。 2.原因可能是因为你柱子没装好，太实也不好，如果是湿法装柱，干法拌样后上样，一定要在柱子上留出来1到2厘米的上层溶剂，在上样，否则拌样的硅胶会吸你湿法时的溶剂，很容易断层。 3.湿法溶解硅胶的溶剂极性一定要小于你初始洗脱剂的溶剂。最好用石油醚或者氯仿等单一的溶剂去溶解硅胶，这样你装柱子时的溶剂极性不会改变。 4.书上说是冲3-5个柱体积，这点在粗分的时候还是长用的，具体冲多少个柱体积，跟你的分离度有关系，我一般是点板追踪是不是换洗脱剂，该等度的时候还是要等度。 5.冲柱子的时候，可以回收着用，最后回收的最好别用了，一种方法是试试你回收的溶剂极性，以后可以当展开剂用，或者回收后用来转移，合瓶子用，也不浪费，而且混合溶剂有利于结晶。 希望对你有所帮助，多多交流 |
2楼2012-11-17 17:33:58
3楼2012-11-18 00:04:31
