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shuqingjiao60木虫 (正式写手)
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求助:请问哪位知道碱性脂肪酶的生产工艺及流程图?本人急需.重谢!
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lhog2007
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4楼2007-07-05 23:59:02
lhog2007
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1.方法一：百度上搜索 2.方法二：上中国专利网找一下相关的工艺专利，并制定自己需要的相关和类似的工艺流程和适应的方案 3.方法三：可以借鉴如下方案：（主要是靠发酵微生物方法获取）[1] 3.1碱性脂肪酶的生产 3.1.1产醉工艺 脂肪酶的生产可采用固体培养和液体深层培养两种方法。固体培养设备比较 简单，易于推广，但容易污染杂菌;而液体深层培养易于控制，不易染杂菌，生 产效率高，目前生产上常采用液体深层培养法生产脂肪酶。 液体深层培养通常采用分批(batch )、添料分批(fed-batch)或连续 C continuance)发酵方式生产脂肪酶。在分批发酵过程中，所有营养物一次加入 发酵罐中，发酵罐必须重复定期清洗、灭菌、接种、发酵和收取酶液，但便于控 制培养条件，酶的产量高，并有利于阻止杂菌的污染，是目前最为常用的一种方 法。其缺点是周期长、生产效率低。在连续发酵工艺中，培养液即有流入也有流 出，发酵罐中培养液的体积和营养物的浓度保持恒定。采用该工艺能够获得更高 的产酶效率，减少设备投资，降低产酶成本，但是不足之处是酶的浓度较低。 液态发酵时提高通风量通常有利于所有的单细胞微生物及大部分丝状真菌 脂肪酶生产，Giuseppin发现Rhizopus delemar无论是菌球还是丝状真菌生长，氧 浓度低于47 a mollL时均对脂肪酶的生产造成溶氧限制，并因此认为氧为限制性 营养因素。高修功等研究了摇瓶转速对假单胞菌产脂肪菌的影响，随着摇瓶转速 的增加，产酶也不断增加，转速增加到140rpm时，酶活达到最高，进一步增加 转速对产酶无明显影响。增加转速可以提高溶氧量，进而有利于脂肪酶的生产。 脂肪酶生产的基本工艺流程如下: 种子罐→→发酵罐→→发酵液 对于发酵液有：发酵液→超滤浓缩→添加填充剂 干燥 造粒包埋 ↓ →盐析→压滤 →干燥 →粉碎 →工业用酶 3.1.2 培养墓与发酵条件 某些微生物只有诱导物存在时才产生脂肪酶，诱导物可以是甘油三脂、长链脂肪酸游离脂肪酸及其某些结构类似物如司班、聚乙二醇单油酸醋等表面活性剂。但也有相反的报道，高修功等也报道假单胞杆菌产脂肪酶不受脂类底物的诱导。但多数实验表明，添加脂类到培养基中能引起脂肪酶产量的明显增加。陶文沂等报道在一定的添加范围内，油脂表现为诱导作用，超过某一界限后则不同油脂效应不同。他们还试验了几种主要脂肪酸对产脂肪酶的影响，结果表明，不饱和脂肪酸对脂肪酶的形成有明显的促进作用，这与谢舜珍等的报道一致，而饱和脂肪酸则作用不明显。唬拍酸钠和吐温80对地霉菌株有明显的负调制作用。 脂肪酶发酵的碳源通常为碳水化合物，如葡萄糖、可溶性淀粉、糊精、糖蜜、麦苏、小麦粉等，碳源的种类通常对脂肪酶发酵无明显的影响‘321。某些微生物还可利用油脂或脂肪酸作碳源如Geotrichum sp菌。金其荣以氢化油为唯一碳源，360C筛出一株耐高温的根霉菌。也有一些微生物如Mucor lipolytica、Aspergillusnige;脂肪酶发酵活力却受到碳源种类的影响较大。 氮源对许多微生物的脂肪酶发酵无明显的影响，如Mucor lipo加ICa .Humicola lanuginose、Aspergillus niger }}6}。动植物的有机氮和尿素都有利于酶的形成，而复合氮源对微生物发酵和产酶比单一无机氮和有机氮更有效Tsujisaka lwai认为对于霉菌，脂肪酶发酵所需的氮源较其它菌种发酵要高。 此外，微量元素和有些添加物对发酵产酶有显著影响。朱明华报道了无机离子对假单胞菌产酶的影响，发现K+, Na+, Mgt+, Cat+等对脂肪酶产生有促进作用，而Mn2+, Bat+, Zn2+, Fe3+, Cot+, Cue+等则抑脂肪酶产生，非离子表面活性剂如Tween, Span及糖脂能刺激胞外酶的产生。陶文沂‘”’报道微量Ca2+可促进地霉产酶，浓度高则呈相反效果。Yoshitaka K.}’报道Fee+, Fe3+能促进Alcaligenessp产酶。吴松刚报道聚氧乙烯十六烷基醚、聚氧乙烯十二烷基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚和吐温40可不同程度的提高脂肪酶的产量.而咪吟则抑制产酶。 许多人对起始pH对脂肪酶产量的影响做了研究，Pal等研究了pH对Aspergillus niger脂肪酶发酵产量的影响，在发酵过程中经常调整pH使之与初始pH相同，发现产酶与生长均在pH 7.0时达到最大，但pH 4.0时单位菌体的脂肪酶产量高于pH 7的单位菌体脂肪酶产量。施巧琴研究了pH对霉菌和细菌产碱性脂肪酶的影响，发现大部分霉菌在pH 7.0的培养基中产酶量最高，在pH 10.0的培养基中其表面产生部分菌丝体，并产生一定量的脂肪酶。静止培养时霉菌的产酶量高于细菌，但采用摇瓶培养，在声10.0细菌的碱性脂肪酶产量高，霉菌几乎不产酶。说明霉菌大部分产酶最适pH是远离作用pH的，而细菌则是相近。 1.4.3脂肪醉的提取 用于蛋白质分离和纯化的技术几乎全部可以用于脂肪酶的研究，如利用热稳定性的不同进行分离，分级沉淀，电泳法，层析法，凝胶过滤技术，等电聚焦等。工业脂肪酶的粗酶制剂常采用硫酸按盐析法、酒精沉淀法和离心喷雾干燥法等方法。 最后，你可以再参考一些微生物发酵类的参考文献和学术期刊，同时强烈推荐[1]的参考文献： 洪骏.碱性脂肪酶的研究 浙江大学 中国优秀博硕士学位论文，2003 |
2楼2007-07-05 11:18:35
shuqingjiao60
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