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fddyn

金虫 (小有名气)

[求助] 玻璃珠和反复冻融哪种方法破壁更充分,谢谢

采用周继中的手提DNA方法提取土壤细菌和真菌DNA,但在破真菌细胞壁上效果不太好,想加一步专门破壁的,不知道是玻璃珠涡旋还是反复冻融对破细胞壁效果好,谢谢
玻璃珠破壁:sigma G-8772 (425-600 um)玻璃珠,在使用前需要洗涤、灭菌等处理还是可以直接用;涡旋转速多大及时间多长
反复冻融:用-80度代替液氮可以吗,-80度10min,65度水浴至完全融化,反复三次可以吗
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银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-09 14:12:20
fddyn: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢啦,我再试试 2012-11-09 19:09:56
自己觉得还是玻璃珠破壁的方法比较好了,至于具体条件可以摸了,一万转10min可以吧,反复冻融的话,影响感觉不大,一般冻存细胞的时候也就那样了,-80和室温之间转化变化不大了
may
2楼2012-11-09 08:16:21
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