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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何失活耐高温酶
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+4 2012-11-09 16:30:47
传统是酚/氯仿抽提再乙醇加盐（乙酸钠）沉淀就得到核酸了。
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为什么
11楼2012-11-09 10:27:04
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+4, ★有帮助 2012-11-09 16:30:55
无水乙醇、异丙醇都是不错的选择
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
12楼2012-11-09 10:28:19
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llliiin

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+4 2012-11-09 16:31:02
保险起见，用蛋白酶K消化一下吧，然后把DNA抽提纯化一下就好了，实惠效果又好
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13楼2012-11-09 10:43:25
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+4 2012-11-09 16:31:07
楼主可以试一下蛋白酶，用蛋白酶处理一下！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
14楼2012-11-09 15:55:57
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jessenju

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-11-09 08:15:29
有商业化的PCR回收试剂盒啊……这种东西专门去除体系里面的酶啊离子啊什么的东西，但是能够保留DNA产物……...

谢谢帮助，呵呵
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15楼2012-11-09 16:28:26
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jessenju

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-09 09:52:58
不知道你后续试验是想做什么的。加入EDTA，因为缓冲液里含有EDTA但浓度不至于让酶失活。只知道DnaseI等酶的失活都是加EDTA，但对后面的实验其实没有太大的影响，如果是想回收里面的DNA，用无水乙醇沉淀纯化一下就可 ...

谢谢帮助
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16楼2012-11-09 16:28:59
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jessenju

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 547star at 2012-11-09 10:27:04
传统是酚/氯仿抽提再乙醇加盐（乙酸钠）沉淀就得到核酸了。

谢谢帮助，可惜金币发完了
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17楼2012-11-09 16:29:50
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ziwen120717

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+2, 谢谢 2012-11-13 16:14:35
关键是你想下面要干什么？这样才能选择方法。
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不想写了
18楼2012-11-09 16:51:11
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375521944

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jessenju: 金币+2, 谢谢 2012-11-13 16:14:26
酶一般都有活性金属离子，可以加EDTA络和，这样酶就失去活性了
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19楼2012-11-09 22:32:34
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frankstone

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以加蛋白酶水解，然后加热使蛋白酶失活。
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做最好的自己。
20楼2013-05-07 18:02:21
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