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容月~

金虫 (著名写手)

[求助] 液相基线不平

现在做的新项目,发现外国标准拿来走后,发现基线不平,是用四丁基硫酸氢铵走梯度,我知道这很难走平,但是别人都做出来了,为啥我们做就不行呢??大家给点改进建议呢!
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有希望就会有奇迹
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
容月~: 金币+1, 有帮助, 我也是那么想的,但是除了这些还有其它的办法没有? 2012-11-07 14:27:58
水啊、试剂啊有时候对梯度影响很大的。建议搞一些高质量的来试试
1234
2楼2012-11-07 14:13:10
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
容月~: 金币+1, 有帮助 2012-11-07 14:31:05
crity328: 金币+2, 感谢应助,欢迎常来分析板块~ 2012-11-07 17:02:07
不知道是怎么个不平法。。。

像楼上说的,梯度洗脱对溶剂和试剂要求较高,用较好品牌的试试;另外,如果基线峰不干扰有时候也不用太追求平的基线,梯度洗脱在一些比例变化大的位置附近,用再好的试剂也会出一些基线峰的
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
3楼2012-11-07 14:25:37
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容月~

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by akosrios at 2012-11-07 14:25:37
不知道是怎么个不平法。。。

像楼上说的,梯度洗脱对溶剂和试剂要求较高,用较好品牌的试试;另外,如果基线峰不干扰有时候也不用太追求平的基线,梯度洗脱在一些比例变化大的位置附近,用再好的试剂也会出一些基 ...

我知道,在比列变化较大的地方会有基线变化,这些可以忽略,但是其它地方出现就是问题了,我是把AB想都加20%水相后平衡的,出来还是有,有没有什么好点的柱子,对离子对实际较好平衡的,推荐推荐。或者其他方法?
有希望就会有奇迹
4楼2012-11-07 14:30:52
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由页梦梦

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
容月~: 金币+1, 有帮助 2012-11-07 16:38:22
液相基线走不平和很原因有关,我师姐他们也是梯度洗脱,做得实验时基线也不平,不过他们是溶剂受温度影响大。你要是液相是在不行,就想办用气相
5楼2012-11-07 15:42:14
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 容月~ at 2012-11-07 14:30:52
我知道,在比列变化较大的地方会有基线变化,这些可以忽略,但是其它地方出现就是问题了,我是把AB想都加20%水相后平衡的,出来还是有,有没有什么好点的柱子,对离子对实际较好平衡的,推荐推荐。或者其他方法?...

这个基线峰其实是很烦的事,而且很常见的

首先这个色谱条件比较奇怪,离子对洗梯度,不知道有没有重现性。。。

这个跟柱子关系不大,除非你的柱子脏了

能不能发个基线图看看,看是否跟我碰到的现象一样。。

我们在实在解决不了的时候,会用C18预处理流动相的水相,把杂质去掉,但是前提是,基线峰是因为杂质而产生的。
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
6楼2012-11-07 16:04:17
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容月~

金虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by akosrios at 2012-11-07 16:04:17
这个基线峰其实是很烦的事,而且很常见的

首先这个色谱条件比较奇怪,离子对洗梯度,不知道有没有重现性。。。

这个跟柱子关系不大,除非你的柱子脏了

能不能发个基线图看看,看是否跟我碰到的现象一样。 ...

貌似这个我从来没有试过,你说的我都很纠结,不过有人都做出来了,肯定我们也不能改变太大,比较感兴趣你说的用C18预处理,怎么处理勒,基线图暂时还没有弄,明天可以发给你看看。
有希望就会有奇迹
7楼2012-11-07 16:37:08
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容月~

金虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 由页梦梦 at 2012-11-07 15:42:14
液相基线走不平和很原因有关,我师姐他们也是梯度洗脱,做得实验时基线也不平,不过他们是溶剂受温度影响大。你要是液相是在不行,就想办用气相

谢啦
有希望就会有奇迹
8楼2012-11-07 16:38:36
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 容月~ at 2012-11-07 16:37:08
貌似这个我从来没有试过,你说的我都很纠结,不过有人都做出来了,肯定我们也不能改变太大,比较感兴趣你说的用C18预处理,怎么处理勒,基线图暂时还没有弄,明天可以发给你看看。...

这个简单,买点c18填料,弄个20cm的预装柱子,把水相过一下,就是说如果水相有杂质就被c18吸附了。

你这个基线峰,是几个尖锐的峰呢,还是鼓包啥的
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
9楼2012-11-07 16:41:39
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容月~

金虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by akosrios at 2012-11-07 16:41:39
这个简单,买点c18填料,弄个20cm的预装柱子,把水相过一下,就是说如果水相有杂质就被c18吸附了。

你这个基线峰,是几个尖锐的峰呢,还是鼓包啥的...

鼓包的也有,尖锐的小峰也有,一个字形容就是丑。
有希望就会有奇迹
10楼2012-11-07 16:43:11
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