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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 急急急！！！关于厌氧菌的传代
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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急！！！关于厌氧菌的传代

液体培养基怎么传代，要用到的是螺口试管还是有专门的厌氧试管呢，真是一窍不通，求助！！！！！万分感谢。
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1楼 2012-11-07 10:34:12
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有那么严格
只是注意微生物污染
严格厌氧就将接菌后置于厌氧罐中，加厌氧剂即可
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小墨825
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
2楼2012-11-07 10:45:37
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zqp9110

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 13:36:26
厌氧菌培养有条件的话最好是用厌氧箱，即厌氧工作站。液体培养的话还可以用玻璃瓶，加橡胶塞，外面再用铝盖封口，接种前后都用氮气饱和就行。平板培养的话放到厌氧罐里加上厌氧包就行。
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小墨825
BEYOND
6楼2012-11-07 12:18:45
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黑鸭子

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 13:36:32
如果不需要严格厌氧，只是兼性厌氧的话，用橡胶塞密封静置培养即可。
如果厌氧比较严格的话，有两种方法：其一，用硅胶塞或者橡胶塞或者纱布都可以，接种后放在厌氧培养箱内培养，或者放在放在密闭的容器内，里面放置厌氧试剂；其二，用无菌过滤膜将容器内空气置换成氮气，然后放在放在厌氧培养箱静置培养即可。
希望对你有所帮助。
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7楼2012-11-07 12:21:34
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黑鸭子

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小墨825: 金币+15, ★★★很有帮助, 非常感谢！！！希望多多交流！！！ 2012-11-08 17:03:57
将氮气充到瓶子里面，因为考虑到无菌问题，所以用0.22微米的过滤膜；抽真空的话，是可以的，但是要考虑到瓶子的耐受压强的问题。简易的厌氧培养箱为找到密闭容器在里面点上蜡烛就ok了。希望对你有所帮助。
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10楼2012-11-08 14:15:17
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zqp9110

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小墨825 at 2012-11-07 15:02:25
没有厌氧箱，我现在是考虑这么做：三角瓶+橡胶塞+封口膜，液体培养，在一般的气候箱静置培养。但是氮气饱和要怎么做？感谢回复！！！...

橡胶塞塞好之后，用接氮气的针头扎进去，充氮气，同时用另一个针头也扎在橡胶塞上，作为出气口，然后不停的摇晃培养瓶，充上3~5min就行。
各种针头和橡胶塞表面用酒精棉消毒。
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BEYOND
13楼2012-11-08 18:03:28
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zqp9110

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 小墨825 at 2012-11-09 09:13:15
充氮气要用到什么设备，我们这里只有大的充氮瓶诶。另外针头反复插橡胶塞也会透气吧？？？不知道这个针头有多大？？...

氮气瓶接减压阀之后，有专用的一排细点的管子，每个管子接一个针头，针头就是稍微大一点的注射器针头。不会漏气的，如果实在不放心，可以再用铝盖封口。
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小墨825
BEYOND
15楼2012-11-09 09:47:09
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-07 10:45:37
没有那么严格
只是注意微生物污染
严格厌氧就将接菌后置于厌氧罐中，加厌氧剂即可

我买了橡胶塞，用橡胶塞塞住就可以了吧。真的什么都不知道啊，师兄师姐也是什么都不知道。。。。。。
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3楼2012-11-07 11:07:09
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 21:45:51
scelab: 金币+7, 谢谢 2012-11-08 10:31:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小墨825 at 2012-11-07 11:07:09
我买了橡胶塞，用橡胶塞塞住就可以了吧。真的什么都不知道啊，师兄师姐也是什么都不知道。。。。。。...

橡胶塞也不能保证是厌氧环境

要厌氧必须置于密闭的罐中，而且在要罐中加厌氧剂

如果不是严格厌氧，可以直接加塞后用封口膜裹住胶塞再置气候箱培养
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4楼2012-11-07 11:14:04
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-07 11:14:04
橡胶塞也不能保证是厌氧环境

要厌氧必须置于密闭的罐中，而且在要罐中加厌氧剂

如果不是严格厌氧，可以直接加塞后用封口膜裹住胶塞再置气候箱培养...

是兼性厌氧的，一般要加什么厌氧剂？封口膜不能灭菌的吧？文献报道厌氧条件下长得比较好，如果是真的要厌氧，就要厌氧瓶吗？
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5楼2012-11-07 11:47:09
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zqp9110 at 2012-11-07 12:18:45
厌氧菌培养有条件的话最好是用厌氧箱，即厌氧工作站。液体培养的话还可以用玻璃瓶，加橡胶塞，外面再用铝盖封口，接种前后都用氮气饱和就行。平板培养的话放到厌氧罐里加上厌氧包就行。

没有厌氧箱，我现在是考虑这么做：三角瓶+橡胶塞+封口膜，液体培养，在一般的气候箱静置培养。但是氮气饱和要怎么做？感谢回复！！！
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8楼2012-11-07 15:02:25
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 黑鸭子 at 2012-11-07 12:21:34
如果不需要严格厌氧，只是兼性厌氧的话，用橡胶塞密封静置培养即可。
如果厌氧比较严格的话，有两种方法：其一，用硅胶塞或者橡胶塞或者纱布都可以，接种后放在厌氧培养箱内培养，或者放在放在密闭的容器内，里面放 ...

多谢回复！！！是兼性厌氧菌，但是能做到严格厌氧会更好。我们这里没有厌氧培养箱，用无菌过滤膜将容器内空气置换成氮气要怎么做，另外抽真空可以吗？
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9楼2012-11-07 15:05:18
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