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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] 急急急!!!关于厌氧菌的传代

液体培养基怎么传代,要用到的是螺口试管还是有专门的厌氧试管呢,真是一窍不通,求助!!!!!万分感谢。
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有那么严格
只是注意微生物污染
严格厌氧就将接菌后置于厌氧罐中,加厌氧剂即可

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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
2楼2012-11-07 10:45:37
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zqp9110

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 13:36:26
厌氧菌培养有条件的话最好是用厌氧箱,即厌氧工作站。液体培养的话还可以用玻璃瓶,加橡胶塞,外面再用铝盖封口,接种前后都用氮气饱和就行。平板培养的话放到厌氧罐里加上厌氧包就行。

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BEYOND
6楼2012-11-07 12:18:45
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黑鸭子

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 13:36:32
如果不需要严格厌氧,只是兼性厌氧的话,用橡胶塞密封静置培养即可。
如果厌氧比较严格的话,有两种方法:其一,用硅胶塞或者橡胶塞或者纱布都可以,接种后放在厌氧培养箱内培养,或者放在放在密闭的容器内,里面放置厌氧试剂;其二,用无菌过滤膜将容器内空气置换成氮气,然后放在放在厌氧培养箱静置培养即可。
希望对你有所帮助。
7楼2012-11-07 12:21:34
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黑鸭子

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小墨825: 金币+15, ★★★很有帮助, 非常感谢!!!希望多多交流!!! 2012-11-08 17:03:57
将氮气充到瓶子里面,因为考虑到无菌问题,所以用0.22微米的过滤膜;抽真空的话,是可以的,但是要考虑到瓶子的耐受压强的问题。简易的厌氧培养箱为找到密闭容器在里面点上蜡烛就ok了。希望对你有所帮助。
10楼2012-11-08 14:15:17
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zqp9110

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 小墨825 at 2012-11-07 15:02:25
没有厌氧箱,我现在是考虑这么做:三角瓶+橡胶塞+封口膜,液体培养,在一般的气候箱静置培养。但是氮气饱和要怎么做?感谢回复!!!...

橡胶塞塞好之后,用接氮气的针头扎进去,充氮气,同时用另一个针头也扎在橡胶塞上,作为出气口,然后不停的摇晃培养瓶,充上3~5min就行。
各种针头和橡胶塞表面用酒精棉消毒。
BEYOND
13楼2012-11-08 18:03:28
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zqp9110

金虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 小墨825 at 2012-11-09 09:13:15
充氮气要用到什么设备,我们这里只有大的充氮瓶诶。另外针头反复插橡胶塞也会透气吧???不知道这个针头有多大??...

氮气瓶接减压阀之后,有专用的一排细点的管子,每个管子接一个针头,针头就是稍微大一点的注射器针头。不会漏气的,如果实在不放心,可以再用铝盖封口。

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BEYOND
15楼2012-11-09 09:47:09
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普通回帖

小墨825

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-07 10:45:37
没有那么严格
只是注意微生物污染
严格厌氧就将接菌后置于厌氧罐中,加厌氧剂即可

我买了橡胶塞,用橡胶塞塞住就可以了吧。真的什么都不知道啊,师兄师姐也是什么都不知道。。。。。。
3楼2012-11-07 11:07:09
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 21:45:51
scelab: 金币+7, 谢谢 2012-11-08 10:31:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小墨825 at 2012-11-07 11:07:09
我买了橡胶塞,用橡胶塞塞住就可以了吧。真的什么都不知道啊,师兄师姐也是什么都不知道。。。。。。...

橡胶塞也不能保证是厌氧环境

要厌氧必须置于密闭的罐中,而且在要罐中加厌氧剂

如果不是严格厌氧,可以直接加塞后用封口膜裹住胶塞再置气候箱培养
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
4楼2012-11-07 11:14:04
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小墨825

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-11-07 11:14:04
橡胶塞也不能保证是厌氧环境

要厌氧必须置于密闭的罐中,而且在要罐中加厌氧剂

如果不是严格厌氧,可以直接加塞后用封口膜裹住胶塞再置气候箱培养...

是兼性厌氧的,一般要加什么厌氧剂?封口膜不能灭菌的吧?文献报道厌氧条件下长得比较好,如果是真的要厌氧,就要厌氧瓶吗?
5楼2012-11-07 11:47:09
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小墨825

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zqp9110 at 2012-11-07 12:18:45
厌氧菌培养有条件的话最好是用厌氧箱,即厌氧工作站。液体培养的话还可以用玻璃瓶,加橡胶塞,外面再用铝盖封口,接种前后都用氮气饱和就行。平板培养的话放到厌氧罐里加上厌氧包就行。

没有厌氧箱,我现在是考虑这么做:三角瓶+橡胶塞+封口膜,液体培养,在一般的气候箱静置培养。但是氮气饱和要怎么做?感谢回复!!!
8楼2012-11-07 15:02:25
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小墨825

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 黑鸭子 at 2012-11-07 12:21:34
如果不需要严格厌氧,只是兼性厌氧的话,用橡胶塞密封静置培养即可。
如果厌氧比较严格的话,有两种方法:其一,用硅胶塞或者橡胶塞或者纱布都可以,接种后放在厌氧培养箱内培养,或者放在放在密闭的容器内,里面放 ...

多谢回复!!!是兼性厌氧菌,但是能做到严格厌氧会更好。我们这里没有厌氧培养箱,用无菌过滤膜将容器内空气置换成氮气要怎么做,另外抽真空可以吗?
9楼2012-11-07 15:05:18
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