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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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475502411

铜虫 (著名写手)

[求助] 毕赤酵母破壁提取包内产物的问题

大家好,前一段时间一直表达不出来,现在表达出来了,但是是包内的,找不到合适的破壁提取的办法。我用的是用蜗牛酶消化1-3小时,再超声20min(超声条件间隙12s、超5s,功率400W/600W),结果效果很不好,很多菌体超不了。
取上清和用8M尿溶解的上清都没有我的蛋白,但是在最后的沉淀中了,我怀疑是破碎的就降解了,沉淀里面的是没有超声完全的。
不知道该怎么办
查了好多资料,目前我们实验室可行的一个方法就是玻璃珠破碎,不知道行不行
高压破碎仪是买不了,也没有液氮研磨的条件
各位有什么高见,清指点一下
不胜感激
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可以朝九晚五,也能浪迹天涯
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