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[求助]
毕赤酵母破壁提取包内产物的问题
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大家好,前一段时间一直表达不出来,现在表达出来了,但是是包内的,找不到合适的破壁提取的办法。我用的是用蜗牛酶消化1-3小时,再超声20min(超声条件间隙12s、超5s,功率400W/600W),结果效果很不好,很多菌体超不了。 取上清和用8M尿溶解的上清都没有我的蛋白,但是在最后的沉淀中了,我怀疑是破碎的就降解了,沉淀里面的是没有超声完全的。 不知道该怎么办 查了好多资料,目前我们实验室可行的一个方法就是玻璃珠破碎,不知道行不行 高压破碎仪是买不了,也没有液氮研磨的条件 各位有什么高见,清指点一下 不胜感激 |
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