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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 木有牛津杯 用什么方法代替比较好啊。。。。。。。。。。。。。。
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zzqbaidu

木虫 (正式写手)

[求助] 木有牛津杯 用什么方法代替比较好啊。。。。。。。。。。。。。。

做抑菌试验  实验室没有牛津杯  买又不方便  用什么代替好啊？或者有啥好方法啊？
滤纸片法做出来效果不咋地，出去纸片半径，抑菌圈才2mm，有用过打孔器的能否详细指点下？


唉  %>_<%  
谢谢！

[ Last edited by zzqbaidu on 2012-11-5 at 19:36 ]
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1楼 2012-11-05 19:34:39
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tachie

金虫 (小有名气)
可以买一段摩托链条，拆解上有很多小环也可以的，还不宜上锈！
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13楼2012-11-09 11:00:48
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zqp9110

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zzqbaidu at 2012-11-07 20:37:54
双层平板？第一次听说啊  具体怎么做双层平板啊  能再详细点吗？
吸管打孔是用乳胶管的那头吧？深度如何控制？
非常感谢！...

当时用双层平板法来做抑菌圈实验是因为直接单层平板涂布接种长出来的菌苔会有涂布棒的痕迹，卖相不好。受到做噬菌体效价实验的启发，就把双层平板法用上了。其实就是把涂布接种这一步用上层平板代替了，具体的：将要接种的菌液融入7ml左右的素琼脂（琼脂加到水中溶解，无营养成分，一般用0.8%）中，混匀后倒在普通平板上铺满，长出来的菌就很平整，没有任何刮痕。至于打孔，其实是有点自虐的选择。倒好双层平板之后，可以用普通的滤纸片法做抑菌圈，但是当时实验结果有些诡异，怀疑是滤纸片有影响，就想不用滤纸片。在上层平板凝固之后，直接用那种薄壁的透明的最普通的吸管（直径约3mm）垂直穿透上层平板那一薄层，形成一个圆饼形上层胶，然后用尖头小镊子小心的挑掉那一小块琼脂胶，形成一个圆形小凹陷，最后往凹槽里加入要检测的药物，正置培养即可。
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BEYOND
10楼2012-11-08 17:28:04
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普通回帖

hnjdd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zzqbaidu: 金币+5, ★有帮助, 唉 很少卖扫装的 2012-11-07 09:20:48
一个牛津杯几块钱，可以散买的，要不了多少钱，去淘宝看看吧
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2楼2012-11-05 23:54:31
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hnjdd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zzqbaidu: 金币+5, ★★★很有帮助, 这个忘了 呵呵 2012-11-07 09:21:13
楼主用滤纸做药敏纸片能确定纸片中的药量吗？有没有用标准药敏片进行比较？
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3楼2012-11-05 23:55:38
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zzqbaidu

木虫 (正式写手)
只知道液体的浓度，但由于是蛋白液体，不好浓缩啊，不知道下步该怎么做，有没有意义，浓度该怎么设。木有对照啊，一般用啥啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2012-11-06 08:21:17
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zzqbaidu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hnjdd at 2012-11-05 23:55:38
楼主用滤纸做药敏纸片能确定纸片中的药量吗？有没有用标准药敏片进行比较？

只知道液体的浓度，但由于是蛋白液体，不好浓缩啊，不知道下步该怎么做，有没有意义，浓度该怎么设。木有对照啊，一般用啥啊
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5楼2012-11-07 09:21:37
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lvxingan1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
打孔器是打固体琼脂块的，你的不是液体吗，拿来干嘛啊？
要我说你还用96深孔板吧，“基础培养基+菌悬液+你的样品”这样做个适当的优化后通过测定菌浓会有较好的结果
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实验一般叫人很纠结..
6楼2012-11-07 11:55:47
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zqp9110

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-07 13:36:10
zzqbaidu: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢！ 2012-11-07 20:35:43
曾经做过双层平板打孔法，可以做出很漂亮的抑菌圈，不过加药体积不能太多，10ul左右吧。做好双层平板，待上层凝固之后，用灭过菌的吸管截出圆形区域，再小心的用镊子挑掉那块小的上层素琼脂，形成一个小凹陷，药物就可以加到这里面。呵呵，微操要求比较高，LZ可以尝试一下。
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BEYOND
7楼2012-11-07 12:25:02
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zzqbaidu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zqp9110 at 2012-11-07 12:25:02
曾经做过双层平板打孔法，可以做出很漂亮的抑菌圈，不过加药体积不能太多，10ul左右吧。做好双层平板，待上层凝固之后，用灭过菌的吸管截出圆形区域，再小心的用镊子挑掉那块小的上层素琼脂，形成一个小凹陷，药物就 ...

双层平板？第一次听说啊  具体怎么做双层平板啊  能再详细点吗？
吸管打孔是用乳胶管的那头吧？深度如何控制？
非常感谢！
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8楼2012-11-07 20:37:54
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hnjdd

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zzqbaidu at 2012-11-07 09:21:37
只知道液体的浓度，但由于是蛋白液体，不好浓缩啊，不知道下步该怎么做，有没有意义，浓度该怎么设。木有对照啊，一般用啥啊...

液体的浓度，你用酶标仪或者比浊仪进行测定了。
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9楼2012-11-07 22:32:33
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