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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC有关问题，求高人···
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德文19

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC有关问题，求高人···

大家好!现在要做HPLC，但是对于这个操作不是很熟，求各位高手指点迷津。做HPLC一般是如何选柱子？一般是用什么洗脱剂，多少比例？需要注意些什么问题···先谢谢了！
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1楼 2012-11-05 14:36:37
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shcz1984

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+1, 谢谢你的解答，有空常来分析板块 2012-11-05 15:28:14
一般是先熟悉操作流程。
HPLC也看你给什么样品做分析。如果是药品的话，一般是有药典的，里面会有流动相，色谱柱的全套资料的，而且是必须按上面的方法检测的。
如果是一般物料或中间体的话，是要进行摸索的，一般先在合成阶段摸索TLC的方法，再根据极性调节的，常见的是甲醇、乙腈和水的1到3种混合作为流动相的
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QQ94523560
2楼2012-11-05 14:52:32
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mikey_m

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
HPLC 现在普遍用C18反相柱
至于操作 还是先上手工作站 对仪器有个大概了解后 再深入学吧
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3楼2012-11-05 15:05:38
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菜葱雨

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+1, 鼓励参与交流，有空常来分析板块 2012-11-05 15:28:30
一般使用C18
至于其他的，多数是根据检测的药品来确定的，
检测的物质对洗脱比，是有要求的，上网都可以查到。
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4楼2012-11-05 15:19:58
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菜葱雨

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
crity328: 金币+1, 鼓励交流，欢迎常来分析版~~ 2012-11-05 15:59:12
常见的是甲醇、乙腈和重蒸水的1到3种混合作为流动相的
最常用的是甲醇和重蒸水。
有时候也需要缓冲剂（对于有PH要求的物质）
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5楼2012-11-05 15:22:56
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2012-11-05 15:59:23
药典上，标准操作规程上面都很详细，先认真看一遍，熟悉理论学习，然后再上手就不难了，
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6楼2012-11-05 15:29:49
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蓝色的小伞兵

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2012-11-05 15:59:33
常用的洗脱，甲醇乙腈，PBS等，根据物质的吸附能力调整不同的比例，这个做之前可以查文献的
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7楼2012-11-05 15:35:01
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令狐冲?坌⌒�

至尊木虫 (知名作家)

魔道圣君

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做之前先查一下相关的文献 然后在这个基础优化 这样才能出好峰
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君子藏器于身，待时而动！
8楼2012-11-05 15:59:03
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winnie的爱

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先你得熟悉你的仪器怎么操作
选柱子有标准的就更着标准走   流动相也是一样的
如果没有标准  柱子流动相都是根据的要测的物质来选了
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9楼2012-11-05 16:38:12
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第二街

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果是中间体的话就要自己摸索，如果是终产物基本上都有相应的国家标准，可以按标准在进行更深一步的探索，最重要的是有耐性
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愿无岁月可回头
10楼2012-11-05 17:33:50
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