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大白菜1989

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助多糖纯化高手,高手来帮我看看吧,新手白菜求助~~

我现在做的是植物多糖分离纯化,已经提取的多糖粗品,并且脱了蛋白,准备上柱子纯化了,上柱子之前我查过文献,不过还是很多不明白的,希望有做过多糖的高手来帮我看看,我准备先上纤维素DE-52柱子,然后再上凝胶G-100,DE-52柱子是用蒸馏水和不同浓度NaCl洗脱的,我想问下DE-52预处理平衡时候的起始缓冲液是我用的第一个洗脱液么...
第二个问题是上样量的问题,想请教下大家,多糖的上样量大概占柱床体积的多少,多糖样品液的浓度该控制在什么范围,流速该控制在什么范围...
本人新手,也许问的问题会很白痴,大家见谅,可以在多糖纯化方面给我些宝贵意见,非常感谢,刚申请的号,总共就仨金币,不要嫌少...
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神雕哥

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

柱子平衡是用第一个洗脱液平衡,注意过的时候样品应该也是溶在第一个洗脱液的,注意样品的溶液和平衡液的Ph值的一致,要不重现性不好,还有就是上样量一般为柱子填料体积的5%,开始你可以先试一下1-2%,至于上样浓度,这些都不好确定,不知道你的样品怎么样,一般可以10mg/ml,其实只要不超过你填料的最大载样量就可以。
2楼2013-05-20 16:44:36
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