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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾

[求助] MTT药物颜色较深,如何设对照组

在做某药物的MTT,结果药物颜色比较深,设的浓度梯度在高浓度时发现对细胞的抑制率反而减小了,请问如何设置药物空白孔来消除药物颜色呢?谢谢大家的帮忙!
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天生我才必有用!
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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenchuan24891 at 2012-10-19 08:15:51
我前段时间也是做类似的工作,不过到现在都没有找到比较好的MTT的方法,我个人觉得比较好的方式就是用CCK-8,这样就没有清洗的过程,每个孔的背景值都可以减去,而且没有因清洗过程带来的误差。就是成本高一些。

用CCK-8确实是比较贵,用MTT,能否直接设不加细胞只加培养液、药物、MTT、DMSO的对照孔呢,或者按文献上将细胞分为A/B两组,A组加细胞、药物及MTT,然后吸弃,在加200ulDMSO测,B组加细胞、培养液,然后吸弃,在加100ul药物及100ulDMSO然后测OD值,这样去除药物颜色影响科学吗?
天生我才必有用!
5楼2012-10-19 09:23:14
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-10-19 09:16:03
采用潘兴瑜的MTT改进法,可以通过离心去除颜色的干扰!多次的离心和吸取上清要求操作者要小心和仔细,否则有降低试验的准确率
2楼2012-10-18 22:28:47
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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾

引用回帖:
2楼: Originally posted by mrzouhao at 2012-10-18 22:28:47
采用潘兴瑜的MTT改进法,可以通过离心去除颜色的干扰!多次的离心和吸取上清要求操作者要小心和仔细,否则有降低试验的准确率

实验室没有离心培养版的离心机啊,只能药物空白对照组了,但是查了文献感觉很模糊,不知如何设
天生我才必有用!
3楼2012-10-18 23:06:17
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chenchuan24891

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-10-19 09:16:10
我前段时间也是做类似的工作,不过到现在都没有找到比较好的MTT的方法,我个人觉得比较好的方式就是用CCK-8,这样就没有清洗的过程,每个孔的背景值都可以减去,而且没有因清洗过程带来的误差。就是成本高一些。
4楼2012-10-19 08:15:51
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