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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » MTT药物颜色较深，如何设对照组
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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾

[求助] MTT药物颜色较深，如何设对照组

在做某药物的MTT，结果药物颜色比较深，设的浓度梯度在高浓度时发现对细胞的抑制率反而减小了，请问如何设置药物空白孔来消除药物颜色呢？谢谢大家的帮忙！
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天生我才必有用！
1楼 2012-10-18 22:10:07
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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenchuan24891 at 2012-10-19 08:15:51
我前段时间也是做类似的工作，不过到现在都没有找到比较好的MTT的方法，我个人觉得比较好的方式就是用CCK-8，这样就没有清洗的过程，每个孔的背景值都可以减去，而且没有因清洗过程带来的误差。就是成本高一些。

用CCK-8确实是比较贵，用MTT，能否直接设不加细胞只加培养液、药物、MTT、DMSO的对照孔呢，或者按文献上将细胞分为A/B两组，A组加细胞、药物及MTT，然后吸弃，在加200ulDMSO测，B组加细胞、培养液，然后吸弃，在加100ul药物及100ulDMSO然后测OD值，这样去除药物颜色影响科学吗？
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天生我才必有用！
5楼2012-10-19 09:23:14
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-10-19 09:16:03
采用潘兴瑜的MTT改进法,可以通过离心去除颜色的干扰！多次的离心和吸取上清要求操作者要小心和仔细，否则有降低试验的准确率
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2楼2012-10-18 22:28:47
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mo-jiajia

木虫 (正式写手)

红领巾
引用回帖:
2楼: Originally posted by mrzouhao at 2012-10-18 22:28:47
采用潘兴瑜的MTT改进法,可以通过离心去除颜色的干扰！多次的离心和吸取上清要求操作者要小心和仔细，否则有降低试验的准确率

实验室没有离心培养版的离心机啊，只能药物空白对照组了，但是查了文献感觉很模糊，不知如何设
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天生我才必有用！
3楼2012-10-18 23:06:17
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chenchuan24891

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-10-19 09:16:10
我前段时间也是做类似的工作，不过到现在都没有找到比较好的MTT的方法，我个人觉得比较好的方式就是用CCK-8，这样就没有清洗的过程，每个孔的背景值都可以减去，而且没有因清洗过程带来的误差。就是成本高一些。
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4楼2012-10-19 08:15:51
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