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急求293细胞繁殖腺病毒方法
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老板让我养腺病毒，但是我不是学生物的，对这方面不太清楚。 之前上网和到图书馆查了好些资料但都没有结果。 有哪位朋友养过的麻烦教下我，谢谢 |
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2楼2007-06-25 16:23:04
johnsooh
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此用户来自小木虫总部信号不好
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3楼2007-06-25 16:49:13
4楼2007-06-30 14:18:35
5楼2007-07-01 16:11:37
sunny_tc
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- 专业: 污染物行为过程及其环境效
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asr(金币+2):thanks,欢迎交流.辛苦了！
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用于扩增和包装腺病毒的应该是293A细胞，是293的一个突变株。感染病毒详细步骤： 1.293A细胞生长至70%左右汇合度，弃去培养基； 2.直径10cm培养皿加入5ml无血清DEME培养基（小心操作，293A细胞极易飘起）； 3.向其中滴加一定滴度的病毒液（刚开始做可以滴加梯度），轻轻晃匀； 4.37度5%co2培养1小时；中途可再晃匀一次； 5.向培养皿中补加5ml含10%小牛血清的DMED培养基，轻轻晃匀； 6.再度至于培养箱中培养2-3天，原代病毒在293A细胞中大量复制并包装，3天左右细胞全部漂起； 7.离心收集细胞，用1mlPBS或无血清DMEM重悬细胞沉淀。 8.-80度~37度反复冻融3次，使病毒粒子释放。 9.5000rpm4度离心十分钟，收集上清即为扩增后的病毒液（无菌操作），可用于继续扩增病毒或用于实验！ 以上为个人实验心的，你可以试一试。好的话请支持一下，半夜里一个字一个字敲进去的啊！  : |
6楼2007-07-06 01:19:09
7楼2007-07-20 15:42:18
