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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 硫酸铵盐析纤维素酶发酵液
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吴佐浩

新虫 (小有名气)

[求助] 硫酸铵盐析纤维素酶发酵液

请问，哪位知道怎么把纤维素酶从发酵液中沉淀出来，我已经试过用不同梯度的硫酸铵，可是得到的沉淀呈絮状，而且用Na2HPO4--柠檬酸缓冲液无法溶解，测不出酶活，，测提取沉淀后的发酵液也没有酶活。估计酶已经变性了，求高手帮忙释惑。
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1楼2012-10-16 14:28:11
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lshenga

新虫 (初入文坛)
楼主，我现在做的也是纤维素酶，硫酸铵沉淀后也是测不出酶活，能问下你当时是怎么解决的吗？
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5楼2015-10-20 19:35:46
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
吴佐浩: 金币+1 2012-10-19 21:00:37
应该是杂蛋白过多，将目标蛋白一起析出。
建议先预处理，去除部分杂蛋白，如膜过滤；
提高目标蛋白的纯度。
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2楼2012-10-16 15:56:48
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吴佐浩

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by virty76 at 2012-10-16 15:56:48
应该是杂蛋白过多，将目标蛋白一起析出。
建议先预处理，去除部分杂蛋白，如膜过滤；
提高目标蛋白的纯度。

我就是要把目标蛋白析出啊，可是得到的是絮状沉淀，不能溶解
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3楼2012-10-16 21:12:17
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
吴佐浩: 金币+1 2012-10-19 21:00:20
可以分步盐析，絮状沉淀可能是疏水性蛋白较多，
可以参考唐孝宣“生物工艺学”相关部分
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4楼2012-10-19 10:33:16
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