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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 果蝇中RNAi乙酰胆碱酯酶，选择什么检测指标
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sara0611

新虫 (初入文坛)

[求助] 果蝇中RNAi乙酰胆碱酯酶，选择什么检测指标

在做果蝇中的RNAi筛选有关实验，如果用乙酰胆碱酯酶的dsRNA进行细胞实验，求教用什么下游基因或者什么物质来检测dsRNA对乙酰胆碱酯酶的干扰是否有影响。
我不知道表述清楚了没有，就举一个例子，一条信号通路上有ABCD四个关键基因，我干扰掉A，检测D的表达就有变化。
现在假设乙酰胆碱酯酶是A，那么选什么作为D比较好呢？
请大家帮帮我指点一下，不胜感激！
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1楼 2012-10-13 15:18:05
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sara0611

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wenzonglu at 2012-10-14 09:41:24
这个问题有点难，因为是细胞实验。乙酰胆碱酯酶体内是通过分解乙酰胆碱而调控细胞间的信号传导，楼主现在研究单个细胞中的变化，建议查询相关文献。可以考虑研究乙酰胆碱酯酶的dsRNA之后对研究细胞膜的电生理学变化 ...

谢谢你，这几天一直在忙没来得及回复你，我个人对实验的理解有误区，正在重新整理~谢谢你
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6楼2012-10-20 10:52:55
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sara0611

新虫 (初入文坛)
就是检测什么才能看出干扰的效果怎么样
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2楼2012-10-13 15:19:12
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wenzonglu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个问题有点难，因为是细胞实验。乙酰胆碱酯酶体内是通过分解乙酰胆碱而调控细胞间的信号传导，楼主现在研究单个细胞中的变化，建议查询相关文献。可以考虑研究乙酰胆碱酯酶的dsRNA之后对研究细胞膜的电生理学变化，例如细胞膜是超极化还是去极化？以及膜电阻的变化等等。“就是检测什么才能看出干扰的效果怎么样":酶作用于它底物，分解乙酰胆碱，按道理检测乙酰胆碱水平既可，但是楼主想一下你的研究细胞体外培养条件下能分泌乙酰胆碱吗？确定了这点再设计
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4楼2012-10-14 09:41:24
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wenzonglu

木虫 (正式写手)
看错了，楼主是研究果蝇的
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5楼2012-10-14 09:42:43
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