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380218013

金虫 (小有名气)


[交流] 感受态转化

最近小弟做感受态转化实验。结果发现空的感受态在AMP平板也长菌落。AMP平板式100毫升+100微升AMP(100毫克每毫升),这样终浓度是100微克每毫升。有木有人有同样的经历和解决办法啊 ???
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380218013

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by seraph09 at 2012-10-13 09:17:17
你得感受态是买的还是自己做的?能不能详细说明你得转化步骤?

买的感受态。步骤质粒50ng加50ul感受态 冰上30min 42°热激 90s 冰上三分钟。加200ul 无AMP培养基扩增30min,涂布平板。过夜。
10楼2012-10-13 19:57:35
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seraph09

新虫 (初入文坛)



380218013(金币+1): 谢谢参与
你得感受态是买的还是自己做的?能不能详细说明你得转化步骤?
2楼2012-10-13 09:17:17
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j2

木虫 (正式写手)



380218013(金币+1): 谢谢参与
AMP是否有效?感受态是自制还是购买?
3楼2012-10-13 09:30:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★ ★
380218013(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-13 16:28:05
如果是购买的感受态细胞,应该不能在氨苄板上长,有可能是抗生素部分失效,或者是到平板是培养基太热。氨苄对温度比较敏感,到板时要让培养基温度冷却到50度以下再加抗生素。
如果自制的感受态,有可能是做感受态过程中有污染。
4楼2012-10-13 09:45:36
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