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challenqing

铁虫 (初入文坛)

[交流] RNA提取OD260/280>4.0?

各位前辈,今天是小弟第3次提取rna了,这几次都是OD260/280在4左右,跑电泳的时候,5s,18s,非常好,但是28s有严重的拖影现象。
请问这是怎么回事了?特别是OD值偏高,难道是机器坏了。
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fruit

木虫 (小有名气)


johnsooh(金币+1):谢谢!
有不同的溶液OD值是不同的,用DEPC水可能会偏低,有tris可能会偏高,用蒸馏水试试。
5楼2007-06-20 10:24:41
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)

有没可能是你提的不错,但跑电泳时上样太高,以致看到拖影,至于OD值么,呵呵,我觉得一般来讲都不是很准,当然4可能确实有些太过了,呵呵,你做什么呀,如果要求一严格的话,直接RT一下,有你要的东西不就OK了么
2楼2007-06-18 12:39:22
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yang22181

木虫 (正式写手)


johnsooh(金币+1):谢谢, 我也认为拖尾的18s RNA是降解造成的, OD260/280 对于 RNA 纯度可以大于2的,好象,^_^
拖影应该是降解的结果吧!?
OD值的比值肯定错误!检查你的分光光度计(找个已知浓度溶液)和比色杯(应用配套石英杯)!
回复内容只代表本人观点,仅供参考&互助;共勉;齐上进
3楼2007-06-18 12:47:23
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lanyu270

降解了,肯定>2.2为降解6
4楼2007-06-19 16:25:38
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