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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒大提试剂盒，可以用生理盐水洗脱吗？
汕头大学海洋科学接受调剂
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btx362237729

金虫 (正式写手)

[交流] 质粒大提试剂盒，可以用生理盐水洗脱吗？

做DNA疫苗，要用很多1ug/ul的高浓度无内毒素质粒，于是想到了质粒大提试剂盒，但是文章中质粒都是溶在生理盐水中的。。。。

大提质粒最后的洗脱步骤可以用生理盐水洗脱吗？？？貌似盐浓度会影响到洗脱效率！

所用到的试剂盒是康为世纪的金牌超量无内毒素质粒大提试剂盒（附件中）
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  • 附件 1 : 金牌超量无内毒素质粒大提.pdf
    • 2012-10-08 12:29:56, 239.3 K

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btx362237729

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1楼 2012-10-08 12:29:51
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小神龙198901

金虫 (正式写手)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
大质粒提取盒…真没用过

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2012-10-08 14:44:00
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btx362237729

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
用纯水洗脱。。。然后我补加NaCl，让他变成生理盐水 行不行啊
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3楼2012-10-08 15:15:07
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
盐浓度还会影响后续的实验吧~一般都是用纯水来洗脱，不过试剂盒自带的洗脱液里面也是含盐的，只是浓度不同而已。如非必要还是用纯水吧，保险一点，而且也不影响后续的转化之类的
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4楼2012-10-08 16:03:55
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btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sxxuan at 2012-10-08 16:03:55
盐浓度还会影响后续的实验吧~一般都是用纯水来洗脱，不过试剂盒自带的洗脱液里面也是含盐的，只是浓度不同而已。如非必要还是用纯水吧，保险一点，而且也不影响后续的转化之类的

= =主要是我做DNA疫苗，所以DNA要用生理盐水来融啊。。。
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5楼2012-10-08 18:16:17
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ixido

木虫 (小有名气)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
用洗脱液洗脱，然后用两倍体积乙醇沉淀，再用70%乙醇洗两次，最后用0.9%盐水溶。

纯水洗脱还是会有损耗吧
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6楼2012-10-08 19:06:05
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
应该可以用生理盐水洗脱的..
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7楼2012-10-08 19:13:45
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btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ixido at 2012-10-08 19:06:05
用洗脱液洗脱，然后用两倍体积乙醇沉淀，再用70%乙醇洗两次，最后用0.9%盐水溶。

纯水洗脱还是会有损耗吧

额。。。纯水洗脱应该是损失最少的吧。。。。。。
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8楼2012-10-09 10:54:58
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btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-10-08 19:13:45
应该可以用生理盐水洗脱的..

就怕量少啊。。。。。。
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9楼2012-10-09 10:55:12
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hofo336699

银虫 (正式写手)
★ ★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-09 15:44:17
用生理盐水？从没试过，实验室也没有生理盐水，呵呵
试剂盒里的是纯水吧
楼上说的乙醇沉淀质粒，损耗更大吧，我看还不如用生理盐水直接洗
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10楼2012-10-09 11:29:32
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btx362237729

金虫 (正式写手)
今天试剂盒到了，我来试试用生理盐水洗脱会怎么样。。。。。。。。。。大家期待我的结果吧 阿门
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11楼2012-10-12 11:32:49
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