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细胞周期
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| 不同细胞的细胞周期怎么可以查到？ |
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jiangyinshen
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2楼2012-10-08 09:11:54
郁离子1560
至尊木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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用流式做PI单染，根据荧光强度来判断细胞所处的周期和处在某个周期的细胞数比例。 PI单染色检测细胞周期 技术简介： 在DNA直方图上G0期细胞峰前出现一个亚二倍体细胞峰为凋亡细胞峰。凋亡细胞DNA被降解，小分子DNA可以通透细胞膜逸出细胞外，凋亡小体也可以带走一小部分DNA，因而凋亡细胞DNA含量下降，由此导致对DNA染料的染色能力下降，在G0峰前呈现亚二倍体峰。 实验步骤： 1．转染目的载体48h后收集细胞样品1X105个，900rpmX5min离心，弃去培养液。 2．各管加入PBS洗细胞一次。 3．离心去PBS，加入预冷的70%的无水乙醇固定。 4．离心去固定液，PBS重悬细胞5min。 5．筛网过滤，离心，弃去PBS 。 6． PI染液重悬细胞，4度避光30min。 7． 流式细胞仪检测：PI用氩离子激发荧光，激发光波为488nm，发射光波长大于630nm，产生红色荧光。 |
3楼2012-10-24 09:16:54