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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 解磷菌解磷问题
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水无忧123

铁虫 (初入文坛)

[求助] 解磷菌解磷问题 已有2人参与

一直在做解磷菌的实验，但是做了一年没有什么结果，不知道是因为菌种退化还是什么原因。我的步骤是首先将菌株从-80摄氏度冰箱中拿出来，用手心的热度将它化开，然后吸1ml到真菌液体培养基，30摄氏度摇一宿后其OD值大概是1.4左右将其放入无机磷培养基中培养，大概8天左右，测定其溶磷和菌体磷，pH大概在3左右，但是溶磷几乎测定不出来（不显蓝色啊），菌体磷还行，不知道为什么？
此外，微生物中CFU/ml这个是怎么做出来啊？
因为是环境的学生，对生物方面的东西不了解，所以问题可能有些肤浅，还希望大家能帮忙解决，谢谢。
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1楼 2012-09-29 17:43:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

党军龙吴应香

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2012-10-07 22:49:22
是细菌还是真菌啊？如果是真菌，培养基的碳源也很重要的，还有就是磷源的选择，多用几种磷矿石。溶磷试验测菌体磷意义不大，主要还是培养液中的可溶性磷。不显色有时和显色剂的配制有很大的关系，试剂最好现配现用，时间长的就失效了。
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道法自然
3楼2012-10-07 21:59:11
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javadig

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

菌种活化一般是先在平板划线，挑长得好的菌落再到摇瓶扩大，然后再做其他实验。
不知道你们实验目的是什么？感觉应该测溶解培养基释放磷更有意义。你说的“pH大概在3左右”不知道是哪个的pH值？有没有连续测磷含量？
个人意见。呵呵。
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4楼2012-10-08 08:10:25
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张、小杨

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by czfscf at 2013-08-22 10:32:15
看用什么培养基了哦 用溴酚蓝的话是 蓝紫色 圈成黄色 如果是别的配方 建议白色的含p粉在倒平板时再加  不要放在一起灭...

我之前做过溴酚蓝的，老板说溴酚蓝即使出黄圈只能说明产生酸性，但不一定解磷，我就从新做的不加溴酚蓝的 你的意思是说 不加溴酚蓝的培养基配方中三磷酸钙要灭菌之后加？你做过这个效果吗？ 如何？
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请叫我张有才、
7楼2013-08-24 13:15:57
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里里浅浅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 张、小杨 at 2013-08-21 17:32:19
你好，我也是最近在做这个，我刚好也是植物营养专业，希望可以加好友，交流下，我想问下 无机解磷培养基配好后 灭完菌的颜色 正常是什么样的呢？我配的时候，因为有三磷酸钙，是乳白色，但是灭完菌之后就成黑褐色了 ...

你好，我最近也是在筛解磷菌，就像你说的，用的三磷酸钙，一开始是乳白色后来灭完菌就是黑褐色，我是从土壤里筛的，现在一直没筛出来，请问你是从哪里筛的呢？现在筛出来了吗？求解答哦~
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8楼2013-09-16 19:33:20
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普通回帖

czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-30 10:00:36
cfu/ml是指每毫升的有效活菌数。稀释涂布就能做，计数。一般我们菌种活化的时候，是从冰箱拿出来后在平板划线，等活化好后挑单菌落在摇瓶。而且解磷的话，各个菌种的解磷作用和能力是不一样的，你要针对你的那株菌的无机磷培养基才行。说不定人家强项是解铝磷，你给人家喂个Fe磷或者Ca磷什么的，当然没有效果。
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Ecological Genomics；the scientific walking hormone
2楼2012-09-29 19:45:25
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张、小杨

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by czfscf at 2012-09-29 19:45:25
cfu/ml是指每毫升的有效活菌数。稀释涂布就能做，计数。一般我们菌种活化的时候，是从冰箱拿出来后在平板划线，等活化好后挑单菌落在摇瓶。而且解磷的话，各个菌种的解磷作用和能力是不一样的，你要针对你的那株菌的 ...

你好，我也是最近在做这个，我刚好也是植物营养专业，希望可以加好友，交流下，我想问下 无机解磷培养基配好后 灭完菌的颜色 正常是什么样的呢？我配的时候，因为有三磷酸钙，是乳白色，但是灭完菌之后就成黑褐色了~ 我确定不是因为灭菌温度的原因把葡萄糖碳化，求解答！~
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请叫我张有才、
5楼2013-08-21 17:32:19
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 张、小杨 at 2013-08-21 17:32:19
你好，我也是最近在做这个，我刚好也是植物营养专业，希望可以加好友，交流下，我想问下 无机解磷培养基配好后 灭完菌的颜色 正常是什么样的呢？我配的时候，因为有三磷酸钙，是乳白色，但是灭完菌之后就成黑褐色了 ...

看用什么培养基了哦 用溴酚蓝的话是 蓝紫色 圈成黄色 如果是别的配方 建议白色的含p粉在倒平板时再加  不要放在一起灭
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Ecological Genomics；the scientific walking hormone
6楼2013-08-22 10:32:15
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张、小杨

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 里里浅浅 at 2013-09-16 19:33:20
你好，我最近也是在筛解磷菌，就像你说的，用的三磷酸钙，一开始是乳白色后来灭完菌就是黑褐色，我是从土壤里筛的，现在一直没筛出来，请问你是从哪里筛的呢？现在筛出来了吗？求解答哦~...

植物根系，根际土里筛，我知道问题了 就是没调好ph 配好培养基之后好好调ph 就好了
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请叫我张有才、
9楼2013-09-22 12:09:12
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里里浅浅

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 张、小杨 at 2013-09-22 12:09:12
植物根系，根际土里筛，我知道问题了 就是没调好ph 配好培养基之后好好调ph 就好了...

恩 我现在是把磷酸钙单独灭菌，现在的培养基颜色是乳白色的，但是倒平板的时候还是有少许沉淀在底部，现在平板上长了好多菌，但是都没有溶磷圈，你平板上已经筛出溶磷菌了吗？我这到底是出现了什么问题啊？
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10楼2013-09-22 14:36:48
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