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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 转速的问题

我按文献取小麦细胞核的方法,用MgSO4缓冲液机械分离,按文献说的最后细胞核的浓度可以达到33×1000/mL,他是这么做的:在切碎后过筛再经1000r/min离心,再重悬浮过筛,问题来了,我也是按他的方法做的,但是经1000r/min离心时,感觉没有离出来沉淀(就是底下沉淀不明显稍微动下就浑浊),又不敢再离一次,也不敢提高转速,实验室他们做动物是3000r/min离,离完底下沉淀很明显。以前用酶解法取原生质体时也是,文献要求500rpm/min离5分钟,我离10分钟都看不见沉淀,他们都说我的转速太小了。我查资料说,离心机用rpm表示是不准的应该用离心力g表示,文献所用离心机可能和我们不同,所以他说的转速可能也不一样。所以我想问问离细胞或者细胞核时所能承受的转速范围大约是多少呢?就是不把细胞核离坏还能让其沉淀。
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
a71840584: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-21 11:09:21
另外,离心机转速换算

换算时,先在及标尺上读取己知的半径,在r/min标尺上读取已知的离心机转速,然后将这两点间画一条直线,与图个Rcf(g)标尺上的交叉点即为相应的相对离心力数值。读取时应注意,如果己知的转速值位于r/min标尺的右侧,则应读取RCF(g)标尺右侧的数值,转速值位于r/min标尺的左侧,则应读取RCF(g)标尺左侧的数值。

离心机转速.jpg

植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2012-09-20 22:20:05
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
对于不同植物不同实验条件,很难给你一个保险的转速范围。最简单的方法,做几个不同转速梯度,看看哪个更合适。做实验应该要自己主动摸索摸索。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-09-20 21:32:52
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-20 22:20:05
另外,离心机转速换算

换算时,先在及标尺上读取己知的半径,在r/min标尺上读取已知的离心机转速,然后将这两点间画一条直线,与图个Rcf(g)标尺上的交叉点即为相应的相对离心力数值。读取时应注意,如果己知的转 ...

嗯谢谢你,我昨天试了,3000r离完细胞核都离坏了,观察的时候几乎看不到完整的核全是碎状染色体,2000r离的也有不少破的,1000r的好点,不离的细胞核浓度又不够,最后还是1000左右吧
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
4楼2012-09-21 11:09:18
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