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ningda47

金虫 (小有名气)

[求助] 看帖就发币(SOD.MDA)

测细胞SOD.MDA.LDH时,将细胞消化,离心,用冷无菌水调节细胞浓度,冰上制备细胞匀浆,具体怎么弄的啊 急救啊,高手顺路来指点指点啊,不胜感激
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xiyanwei1234

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你说的这个我没做过,下面的是百度搜的。不过测细胞SOD.MDA.LDH的不都用试剂盒吗,应该有说明书啊。

匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超生匀浆,反复冻融。
1.手工匀浆:
将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或冷生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,

一起倒入匀浆管中进行匀浆左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杵垂直插入套管中

,上下转动研磨十次(6-8分钟),充分研碎,使组织匀浆化。

2.机器匀浆:
用组织捣碎机10000-15000r/min上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时

间10秒/次,间隙30秒,连续3-5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。

3.超生粉碎:
用超生粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超生发生器以振幅14微米超生处理30秒使细胞破碎,也可

用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次间隙10秒反复3-5次。

4.反复冻融:
培养或分离的细胞可以用以上1、2、3的方法匀浆,也可以反复冻融3次左右(即让细胞加适量的低渗

液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,融解,再结冰,再融解,反复3次左右),但有部分酶活性会受影响。
龙飞凤舞
4楼2012-09-21 15:52:47
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