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熊猫圣旨

铜虫 (初入文坛)

[求助] CTAB溶解问题,求大侠相助!

3%的CTAB试过用高压灭菌,磁力搅拌,水域加热,超声波击碎等等方法都不见效,液提还是呈乳白色,且有沉淀,里面加有1%的PVP,1M的Tris盐酸,氯化钠,0.5M的EDTA,要配500毫升,怎么弄呢,这和pH相关吗?还是应该最开始就把试剂分别溶解后再加在一起呢?求神助!
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-18 15:50:49
要加热的,煮沸,氯化钠,CTAB,PVP这三个放一起,tris和EDTA,分开溶解,调节pH8.0,比较易容,混合后煮沸溶解,冷却后就是澄清的了
风雪夜归人
5楼2012-09-18 12:37:58
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普通回帖

wittyjc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pH调到8 。可以一起溶。
2楼2012-09-18 11:09:40
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我自己是分开溶的,这样不会出错,是麻烦了点,最后加CTAB,灭菌即可
3楼2012-09-18 11:34:44
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熊猫圣旨

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wittyjc at 2012-09-18 11:09:40
pH调到8 。可以一起溶。

调pH没有影响吗?因为上面没有写要调pH
4楼2012-09-18 11:44:17
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熊猫圣旨

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-09-18 12:37:58
要加热的,煮沸,氯化钠,CTAB,PVP这三个放一起,tris和EDTA,分开溶解,调节pH8.0,比较易容,混合后煮沸溶解,冷却后就是澄清的了

不可以一起放完之后溶解吗,我就是这么干的,融不掉啊,不可能是我配错的呀,究竟怎么个事儿呢?急呀
6楼2012-09-18 16:45:29
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 熊猫圣旨 at 2012-09-18 16:45:29
不可以一起放完之后溶解吗,我就是这么干的,融不掉啊,不可能是我配错的呀,究竟怎么个事儿呢?急呀...

tris和edta比较难溶的,而且浓度很大,调节PH的时候要用固体氢氧化钠和浓盐酸的
风雪夜归人
7楼2012-09-18 20:42:26
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熊猫圣旨

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-09-18 20:42:26
tris和edta比较难溶的,而且浓度很大,调节PH的时候要用固体氢氧化钠和浓盐酸的...

貌似PVP要最后加啊,要先把其他的试剂溶完再加PVP才能溶啊,这是什么原因呢
8楼2012-09-19 10:16:55
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我以前配过这个溶液,是用作提取基因组DNA的,当时也加了PVP,你可以最后加PVP,我记得当时是先加NaOH,我记得当时加了很多才溶的,你可以试一下
9楼2012-09-19 22:15:57
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素素2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Tris 和EDTA 这些都要分开配,并且PH均需要调到8.0,都分开配好以后,再按照需要,取适合的量,配CTAB溶液,并需要加热到近沸腾,才可以溶解。
10楼2012-09-20 11:08:39
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