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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 菜鸟求教，同样样品分光光度法能测黄酮含量，液相色谱却测不出黄酮？
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fair

金虫 (著名写手)

[求助] 菜鸟求教，同样样品分光光度法能测黄酮含量，液相色谱却测不出黄酮？

如题，人工培养细胞提取黄酮，分光光度法可发生显色反应测黄酮含量，但是提取液用传统方法HCl水解再液相分析，什么峰都没有，可能是什么原因？
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总是纠结！
1楼 2012-09-12 11:32:14
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2 2012-09-12 14:38:10
fair: 金币+5, ★有帮助, 谢谢交流 2012-09-13 10:47:02
首先用HPLC做一下黄酮的标样，确定仪器和条件有没有问题

液相没有问题，就是提取方法有问题
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梦想、激情、灵感、体验--che
2楼2012-09-12 12:03:58
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fair

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-09-12 12:03:58
首先用HPLC做一下黄酮的标样，确定仪器和条件有没有问题

液相没有问题，就是提取方法有问题

标样的HPLC很正常，仪器，条件肯定没问题，提取和水解都是别人报道的很成熟的方法，就是做不出来，很纠结，如果样品有问题，为何能发生黄酮的显色反应测吸光值呢？
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总是纠结！
3楼2012-09-13 10:50:47
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穿心莲

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

显色那是邻二酚羟基，不代表一定是黄酮。液相的话，比较准确。不知道为什么要酸解，获得苷元么，万一时间没搞好，就会把苷元也破坏掉。
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4楼2013-05-14 15:09:35
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fair

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 穿心莲 at 2013-05-14 15:09:35
显色那是邻二酚羟基，不代表一定是黄酮。液相的话，比较准确。不知道为什么要酸解，获得苷元么，万一时间没搞好，就会把苷元也破坏掉。

水解获得苷元是因为苷元的标样容易买到，这个可能问题还是出在水解上，有些文献报道的方法真是重复不了
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总是纠结！
5楼2013-05-14 22:14:37
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笑盲虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

样品处理过程中的问题，不明白楼主为什么要酸解，同样你的样品酸解后直接进样吗
你可以将黄酮直接当做样品，按照你样品处理过程进行处理，然后进样HPLC ，看看标样经过处理后，出峰是否正常，若正常，就是人工细胞没有将黄酮提取出来，而提出来的是其他物质，若没有峰，则考虑酸解的过程中黄酮苷元被处理掉了    然后在继续排查问题
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用文字走路，用行动分析
6楼2013-05-15 08:48:18
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