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baoyuan8384

木虫 (著名写手)

[求助] 产甲烷菌培养基在加热灭菌后变血红色是什么原因 已有1人参与

虫友们,大家好,近期我在做产甲烷菌富集培养过程中,先按照产甲烷培养基的配方配好培养基之后(注意此时微量元素先没有加,准备接种时加入,防止加热时Fe离子被氧化而呈的红色),再加入1g刃天青,然后放到电炉上加热5分钟,同时向培养瓶内充入高纯氮气5-10分钟以赶出瓶内氧气,然后用棉花快速塞住瓶口,再用报纸在外面包扎起来,立即送到灭菌锅内加热到121度,持续20分钟灭菌,冷却后拿出发现培养基是血红色的,发现问题后,这个试验我重复做了4次,每次结果都是一样的,请教前辈们,我这是怎么回事呀,如果有氧气,刃天青的颜色是淡紫色或者浅红的呀。为什么我的这个是血红的呀?更何况我在配制培养基时还充氮气了呢,如果继续用这个培养基做实验,后面会产气吗?
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cly2810

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

变红是正常的,说明里面还有微量的氧气。灭完菌之后,在加入除氧剂,也就是半胱氨酸,就变成无色。说明已经达到了除氧的效果。
5楼2012-11-20 11:28:42
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普通回帖

baoyuan8384

木虫 (著名写手)

我的产甲烷菌富集培养基:每1000mL无菌无氧水中加入K2HPO4 0.4g,MgCl2 2.0g,KH2PO4 0.4g,酵母浸入液1.0g,NH4Cl 1.0g,乙酸钠2.0g,KCl 0.2g,NaCl 2.0g,微量元素溶液10.0mL,pH值6.5。
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2楼2012-09-11 11:06:11
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198806011622

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by baoyuan8384 at 2012-09-11 11:06:11
我的产甲烷菌富集培养基:每1000mL无菌无氧水中加入K2HPO4 0.4g,MgCl2 2.0g,KH2PO4 0.4g,酵母浸入液1.0g,NH4Cl 1.0g,乙酸钠2.0g,KCl 0.2g,NaCl 2.0g,微量元素溶液10.0mL,pH值6.5。

我也是做这方面工作的,但是并没有出现以上现象,配方都一样,最终灭菌出现的是培养基的颜色,但PH是7····说不定是你的药品被污染了,我们实验室条件有限并没充氮气煮沸除氧,但是效果还不错,也是做产气···
3楼2012-09-11 11:15:55
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baoyuan8384

木虫 (著名写手)

今天又做了一次,先加入了L-半胱氨酸,然后在加热灭菌的,结果就没再出现上几次的问题,但是我看见的论文是灭完菌之后再加的半胱氨酸的,这是为什么呢?
滴水穿石、厚积薄发!
4楼2012-09-18 15:58:08
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baoyuan8384

木虫 (著名写手)

以前不知道,以为培养基有问题,全部都倒掉了,然后重新配还是有问题,后来我是一边充氮气。一边加热,至10分钟后终于变无色了。失败的教训告诉我:加热时间短也不行啊。
滴水穿石、厚积薄发!
6楼2012-11-21 16:33:24
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大鱼小心

木虫 (正式写手)

请问配多少培养基加1g刃天青呀?这玩意我买一克都150啊
7楼2013-04-18 10:08:19
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baoyuan8384

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 大鱼小心 at 2013-04-18 10:08:19
请问配多少培养基加1g刃天青呀?这玩意我买一克都150啊

500ml的培养基,我买的一小瓶刃天青,好像是挺贵的,为了科研,要有牺牲精神啊
滴水穿石、厚积薄发!
8楼2013-09-13 09:52:56
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cly2810

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-11-24 23:29:55
放的时间不够长,有时候得在厌氧箱放一天才能从红色变成无色
9楼2013-11-24 20:05:35
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niuyuniu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

亲们,弱弱的问一下你们用的培养液那么多成分啊?哪算溶液还是胶体啊?
10楼2014-02-12 21:05:35
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