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phoebeww

铜虫 (小有名气)

[求助] 这个实验步骤是啥样的啊 最好学分析的进

The experiments were performed in 80 ml solution consisting of 5.0*10–8
M probe, 5.0*10–8M primer, 15 U polymerase Klenow fragment exo, 100 mM dNTPs, 6%DMSO, 1 mM DTT and 5 mM MgCl2 in 50 mM Tris–HCl (pH 8.0) and incubated at 37℃.
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1楼 2012-09-08 17:39:34
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xiaohanhan2007

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
sltmac: 金币+1 2012-09-09 07:52:42
phoebeww: 金币+5, 翻译EPI+1, ★有帮助 2012-09-10 19:25:02
在80 ml溶液中进行实验，该溶液包含5.0*10–8 M的探针，5.0*10–8M的引物，15 U的无外切酶活性的聚合酶Klenow片段，100 mM的dNTPs，6%DMSO，1 mM的DTT和5 mM的MgCl2（50 mM Tris-HCl，pH8.0），并将该溶液置于37℃孵育。
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2楼2012-09-08 21:03:47
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phoebeww

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaohanhan2007 at 2012-09-08 21:03:47
在80 ml溶液中进行实验，该溶液包含5.0*10–8 M的探针，5.0*10–8M的引物，15 U的无外切酶活性的聚合酶Klenow片段，100 mM的dNTPs，6%DMSO，1 mM的DTT和5 mM的MgCl2（50 mM Tris-HCl，pH8.0），并将该溶液置于37℃ ...

谢谢，我其实是想问它们分别加多少量啊？
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3楼2012-09-10 19:24:51
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xiaohanhan2007

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by phoebeww at 2012-09-10 19:24:51
谢谢，我其实是想问它们分别加多少量啊？...

这个文献的意思是，溶液的总体是80 ml,您可以直接在80 ml水中加入纯固体和纯液体，换算成最终的浓度；或者先配一个很浓的母液，取几微升再加到这个最终的溶液里面，达到所需要的浓度而基本不改变溶液体积
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4楼2012-09-10 19:54:29
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phoebeww

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaohanhan2007 at 2012-09-10 19:54:29
这个文献的意思是，溶液的总体是80 ml,您可以直接在80 ml水中加入纯固体和纯液体，换算成最终的浓度；或者先配一个很浓的母液，取几微升再加到这个最终的溶液里面，达到所需要的浓度而基本不改变溶液体积...

我写错了，应该是80ul……不过这里面的固体不好直接往里面加，只能加液体，但是液体就要计算需要的体积，因为这里面也没说他们的比例，所以就不知道了
我想知道，他里面所说的浓度是最终的浓度还是加进去溶液的浓度啊？
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5楼2012-09-12 09:20:12
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xiaohanhan2007

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
phoebeww: 金币+5, ★有帮助, 好的，谢谢你的热心帮助！~ 2012-09-12 11:47:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by phoebeww at 2012-09-12 09:20:12
我写错了，应该是80ul……不过这里面的固体不好直接往里面加，只能加液体，但是液体就要计算需要的体积，因为这里面也没说他们的比例，所以就不知道了
我想知道，他里面所说的浓度是最终的浓度还是加进去溶液的浓 ...

嗯，您的实验步骤里面给出的是最终的浓度哦，一般这种有两种办法：一个是把所有的物质浓度计算在内，列一个方程重新计算应该加的原始体积；另一个方法是把原始物质的浓度配得非常浓，拿移液枪加个零点几微升那种，就不会影响最终体积，那么就很好计算了
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6楼2012-09-12 11:28:28
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