应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问pEGFP-N1这个载体转化DH5能不能看到GFP的表达？
71/1返回列表
查看: 1232  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

emma立夏

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请问pEGFP-N1这个载体转化DH5能不能看到GFP的表达？

请问，pEGFP这个质粒能不能在原核菌里表达出GFP蛋白呢？
还是一定要转化真核才能见到gfp发绿光吗？
在真核转化的时候，有没有人用过酵母转化试剂盒呢？
谢谢大家！请有相关经验的伙伴们能提供宝贵的建议！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2012-09-05 15:14:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
emma立夏: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢你的帮助 2012-09-05 17:03:55
pEGFP转化原核菌无法看到绿色荧光，因为该载体为真核表达载体，EGFP基因前启动子为真核启动子，无法在原核系统中起作用，因而EGFP是不会表达的，酵母中应该可以，相关试剂盒咨询试剂生产商，个人认为该载体最好转染293等模式细胞系来观察荧光，效果最好，但是不知道楼主的实验目的是什么。
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-05 15:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不能！原核和真核要分开！
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

emma立夏
生物化学与分子生物学
3楼2012-09-05 15:59:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

emma立夏

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huguangdong at 2012-09-05 15:25:58
pEGFP转化原核菌无法看到绿色荧光，因为该载体为真核表达载体，EGFP基因前启动子为真核启动子，无法在原核系统中起作用，因而EGFP是不会表达的，酵母中应该可以，相关试剂盒咨询试剂生产商，个人认为该载体最好转染 ...

目的是想要用GFP作为报告基因来检测某个基因的表达量的。我用的AH109酵母，转化了好久都没有做出来了，很郁闷，想着用试剂盒了，但是是市面上的试剂盒不知道哪个好呢。。。。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-05 17:06:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

emma立夏

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-05 15:59:04
不能！原核和真核要分开！

谢谢
回复此楼
5楼2012-09-05 17:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”
你可以转化模式植物的，如烟草什么的，转化后用荧光显微镜看！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
6楼2012-09-05 18:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by emma立夏 at 2012-09-05 17:06:35
谢谢

客气
回复此楼
生物化学与分子生物学
7楼2012-09-06 08:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 emma立夏 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[考研] 求调剂 +5 yunziaaaaa 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:57 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +6 YXCT 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:21 by 向上的胖东
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭