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num20062622

银虫 (正式写手)

[求助] 斜面试管怎么制作?

斜面试管是先把培养基装到试管里(不用棉塞 用塑料盖子)
盖子要不要拧紧?
然后再盖子上包上报纸
然后放到高压蒸汽灭菌锅里灭菌30min?
压力降到0时
待温度差不多50°左右把试管拿到超净工作台里然后摆成斜面
等到凝结的差不多的时候 再接种菌种 放到四度冰箱
这么操作对么?


还是把试管灭菌完 再超净工作台里往试管里加培养基?
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num20062622

银虫 (正式写手)


很多实验的细节 没见别人做过
应该保存菌种的人都做过试管斜面的..,
2楼2012-09-04 18:16:44
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普通回帖

little_Jimmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+3, 新虫加油 2012-09-04 23:08:20
首先倒入培养基,有条件使用硅胶塞 没有条件棉塞也可以。高压蒸汽灭菌30分钟,拿出来后摆成斜面。接种后按照生长温度进行培养,待斜面上看到菌落后4度冷藏保存,大体是这样的
我们都是小吉米
3楼2012-09-04 21:33:03
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num20062622

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by little_Jimmy at 2012-09-04 21:33:03
首先倒入培养基,有条件使用硅胶塞 没有条件棉塞也可以。高压蒸汽灭菌30分钟,拿出来后摆成斜面。接种后按照生长温度进行培养,待斜面上看到菌落后4度冷藏保存,大体是这样的

硅胶塞?我们实验室有塑料的盖子 那种旋口的
高压蒸汽灭菌的时候盖子要塞紧么?
往试管里倒培养基的时候用啥倒进去的
我怕把培养基沾在试管壁上这样容易污染..
4楼2012-09-04 22:48:42
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a418459781

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+3, 新虫加油 2012-09-04 23:08:28
num20062622: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-05 09:36:25
1.盖子要封住口,但不能封死,要能透气,不然灭菌有可能开盖。
2.移液管加到试管中,灭菌30min,温度自己注意,不同培养基不同。
3.拿出来后摆成斜面。接种后按照生长温度进行培养,待斜面上看到菌落后4度冷藏保存
5楼2012-09-04 23:03:53
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little_Jimmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
num20062622: 金币+3 2012-09-05 09:35:10
我们做的时候就是用两种 ,硅胶塞或者棉塞。没有用过塑料盖 透气性不好。 其实最好是硅胶塞 ,透气不透菌。灭菌的时候紧一些没有关系。一般是用漏斗倒进去的,但是一定要快,防止琼脂凝固。培养基沾在试管壁上没有关系啊 反正也是要灭菌的。但是灭菌之前一定要先摆一下斜面,看看倒的培养基是否粘在试管塞上,如果沾在试管塞上就取出一些。
我们都是小吉米
6楼2012-09-04 23:11:31
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思遥54

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先倒培养基的,灭菌完了之后降里压力,拿出来时培养基还是有一定温度,倾斜放就是斜面培养基了,使用时再去超净台操作就行了,旋盖也可以,不过不能拧太紧,也不能太松,旋盖稍微有些松动就好了,如果盖太紧,可能在灭菌过程中爆裂的呢!祝你成功!
7楼2012-09-04 23:24:55
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liulaizhuang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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num20062622: 金币+2, 有帮助 2012-09-05 09:37:38
看来楼主是新手啊,斜面是保藏菌种用的,培养基配好后,加琼脂煮沸5分钟,再加到试管中,盖上橡皮塞或者棉塞,121℃蒸汽灭菌25分钟,压力降为0,温度降为70摄氏度左右(这个没有太多规定,只要培养基还没凝固就行),取出试管,摆成斜面,待其凝固后4摄氏度保存,以后可以接菌株用
8楼2012-09-04 23:52:42
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songychnju

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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num20062622: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-05 09:36:00
高压蒸汽灭菌的时候盖子要塞紧么?
有塑料的盖子 那种旋口的的试管,,旋二道即可,等摆好斜面凝固后放无菌超净台中将包在外面的报纸拿去后,旋紧,包纸后放在保鲜袋内于4度冰箱保存待用。后可以装培养基三分之一高度即可

往试管里倒培养基的时候用啥倒进去的?
最好用5毫升加样枪,因枪头长不易弄脏管壁,最便宜那种即可,或废弃不用的加样枪都可以。如有分液器效果也不错,但要注意培养基热时分装最好。
祝好运!
9楼2012-09-05 07:49:50
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num20062622

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by a418459781 at 2012-09-04 23:03:53
1.盖子要封住口,但不能封死,要能透气,不然灭菌有可能开盖。
2.移液管加到试管中,灭菌30min,温度自己注意,不同培养基不同。
3.拿出来后摆成斜面。接种后按照生长温度进行培养,待斜面上看到菌落后4度冷藏保存

嗯 太感谢你了...

看资料都说菌落要长到充满斜面..
我觉得这样的话 菌就有点老了..
10楼2012-09-05 09:31:52
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