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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于真菌 从头学起...
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num20062622

银虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lw0501 at 2012-09-03 17:58:58
单孢分离，
提总DNA，
扩ITS并测序，
BLAST基本可知种属。

我不做ITS测序...

只想形态学鉴定
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11楼2012-09-03 21:24:05
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zjinlong

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+5, x谢谢热心交流~ :) 2012-09-05 09:07:59
对于一种未知的真菌，最基本的是通过观察其形态，借鉴真菌鉴定手册来确定，同时也可以通过真菌通用引物进行ITS序列扩增，通过测序得知是什么菌（但是该菌还不能确定是该病的致病菌，因为有可能为腐生菌），要确定是否为该病的致病菌，还需要通过科赫氏法则进行鉴定。即把分离到的菌重新接回健康植株，能导致发病，而且发病症状与之前的相同，然后再重新分离，获得与第一次分离相同的菌，就可以确定为该病的致病菌。
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12楼2012-09-04 09:32:25
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num20062622

银虫 (正式写手)
★
scelab: 金币+1, 重新分离。。。被催 2012-09-05 09:08:25
引用回帖:
12楼: Originally posted by zjinlong at 2012-09-04 09:32:25
对于一种未知的真菌，最基本的是通过观察其形态，借鉴真菌鉴定手册来确定，同时也可以通过真菌通用引物进行ITS序列扩增，通过测序得知是什么菌（但是该菌还不能确定是该病的致病菌，因为有可能为腐生菌），要确定是 ...

谢谢你的解答..
你说的很全面..
是针对一种未知真菌的实验方案..

不过我的不想做ITS测序
因为这部分工作我实验室毕业的师姐做过了..
因为她毕业走的时候没保存菌种
所以我要重新分离出她以前做过的菌种
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13楼2012-09-04 15:41:06
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angelyou

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

提DNA，扩ITS，测序比对。
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14楼2012-09-06 09:12:48
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草溪河

铁虫 (著名写手)
科赫氏法则确定病害的病原物，
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15楼2012-09-17 22:19:28
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num20062622

银虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 草溪河 at 2012-09-17 22:19:28
科赫氏法则确定病害的病原物，

科赫氏法则是为了确定这个菌是不是致病菌的
但是不能鉴定菌种啊..

鉴定菌种需要经验丰富的人才行
光从形态上 我都觉得各不一样
别说看孢子 看菌丝了..
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16楼2012-09-20 21:49:45
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lshufang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主，建议用按柯赫氏法则印证一下。
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17楼2012-09-23 16:39:54
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zzit

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一般的真菌通过菌落和无性繁殖体的显微镜观察即能进行鉴定，但需要经验。如果给出上述照片，网上也许可以帮着鉴定。
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18楼2012-09-23 22:51:35
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zengsihai

木虫 (小有名气)

iloveemuch

【答案】应助回帖

这位虫友：
     我的观点是结合：（1）找资料、（2）培养诱导子实体形态观察和（3）接种三个方面进行。
    资料，让我们的实验和判断有方向性；形态，可以看到真菌的面目（当然是子实体了），有了无性的子实体，设法诱导获知有性子实体；接种，显症，完成科赫法则，是验明致病菌的正身，但是耗时长久。
    侧重在哪一点，得看具体的病例了，寄主怎样、病原菌怎样，得具体分析，如果不容易出子实体，那就提dna，pcr后，做blastn。一定要结合文献等信息有一个大致的方向。否则，效率低不说，很可能做大量无用功。
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zengsihai
19楼2014-07-22 11:45:09
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