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xiongba

铁虫 (小有名气)

[交流] caco-2细胞模型的验证 已有1人参与

各位虫友,小弟最近在做caco-2细胞模型,打算用甘露醇评价膜的完整性,可是没有查到评价方法。比如:甘露醇的浓度、透过率小于多少算合格。。请各位帮帮忙,给俺说说。。谢谢
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jakytam

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
jiangchunyong: 金币+2, 谢谢 2012-09-19 09:42:31
我们实验室没有用甘露醇或荧光黄,在实验室刚建立Caco-2转运模型时不仅要测电阻,还要对本实验室的模型进行验证,可以测定已知低、中、高渗透性的标准化合物的渗透性,和已报道的数据比对分析,进行验证,只要数据相近,在同一数量级相差不非常大即可。模型验证后,不能变动培养的条件,保持细胞10代以内进行试验,如总是使用37代到46代之间的细胞。
    接种后培养19-21天后做实验,只需测定电阻即可。有3天的时间可以选择做,3天的时间是指培养的第19-21天之内进行试验。我们实验室没有用甘露醇或荧光黄,只是测定电阻值就可以了,国内外绝大部分实验室也是这样做的,方法简单,不干扰结果;
    转运实验难在培养,其它过程只要按SOP,小心操作就行了。
2楼2012-09-05 09:03:45
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xiongba

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jakytam at 2012-09-05 09:03:45
我们实验室没有用甘露醇或荧光黄,在实验室刚建立Caco-2转运模型时不仅要测电阻,还要对本实验室的模型进行验证,可以测定已知低、中、高渗透性的标准化合物的渗透性,和已报道的数据比对分析,进行验证,只要数据相 ...

我就是刚建模型啊,所以很多的条件都不成熟。。现在又有问题了,发现用hank’s给药时,在培养箱孵育一小时细胞就不行了,,后来又做了一个只加hank‘s的实验,结果一下,细胞又死了,这是什么原因啊?
3楼2012-09-18 21:26:32
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