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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » DNA传感器-多步反应,一个电极上依次完成各步反应还是在不同电极上完成不同步骤的反应
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pfeng00

木虫 (正式写手)

[求助] DNA传感器-多步反应,一个电极上依次完成各步反应还是在不同电极上完成不同步骤的反应

我的实验是一个多步骤反应，包括：1-自组装，2-MCH钝化，3-第一次杂交，4-第二次杂交，我想判断步骤3和步骤4是否成功发生（即这两步完成后电化学参数是否有变化），那么下面两种做法哪种才是合理的呢？如果都不合理那么正确的做法是怎样的？
做法1：在一支电极上依次将这几个步骤做完，每完成一个步骤测一次电化学参数，然后比较几个不同步骤的参数的变化来评价整个电化学反应。
做法2：用5支电极来做这个实验，分别用以评价裸金电极的状态、完成步骤1后自组装的情况、完成步骤1和2后的电极状态、完成步骤1-3后的电极状态、完成步骤1-4后的电极状态。

感觉电化学实验重复性很差，有时候几支裸金电极电化学参数几乎一样的电极做同样的反应，到第一步或者第二步的时候差异都很大了，所以觉得做法2各电极表征的不同步骤完成后的电化学状态没有可比性。如果按做法1做，不知在电化学扫描或后续的反应中是否会导致自组装的DNA脱落从而影响后续结果，如果存在这种影响，影响有多严重？

[ Last edited by pfeng00 on 2012-8-18 at 18:20 ]
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1楼 2012-08-16 19:55:30
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abc5710110

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

电化学传感器本身就不稳定，做着玩吧。
你的这种差异可以通过重复试验来分析结果，一次测量很难说明问题。
另外，你可以按照做法1 平行做3-5个电极，计算平均值，比较修饰、处理前后的电极变化；
或者多重复做法2，如果有想要的变化或趋势，也是能够说明问题的。

电化学传感器修饰步骤越多，检测步骤越多，误差积累的就越多, 重复性、准确性、可靠性都将会受到质疑。你最后一句问影响有多严重？ 如果检测探针的量（我的理解）都不能保证，那么，又有多大的自信说我的检测结果很可靠呢。
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强化多边交流，实现互利共赢
2楼2012-08-30 16:14:46
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

首先摸索组装的最佳条件，按做法1进行。金属电极表面第一步自组装成功的关键取决于电极表面的清洁程度。
当各步的实验条件知道后，最后才正式测量。这时只关心后面两个杂化过程的CV或EIS与浓度的相关性。
根据很多文献报道和推理，这种电化学方法应该具有统计可比性。
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Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
3楼2012-08-30 17:14:49
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pfeng00

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by abc5710110 at 2012-08-30 16:14:46
电化学传感器本身就不稳定，做着玩吧。
你的这种差异可以通过重复试验来分析结果，一次测量很难说明问题。
另外，你可以按照做法1 平行做3-5个电极，计算平均值，比较修饰、处理前后的电极变化；
或者多重复做法 ...

不好意思 以为没人应助了 就没继续关注了 现在不能送金币了......只能口头感谢一下 非常感谢您的建议
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4楼2013-03-15 11:46:28
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pfeng00

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Jackcd12 at 2012-08-30 17:14:49
首先摸索组装的最佳条件，按做法1进行。金属电极表面第一步自组装成功的关键取决于电极表面的清洁程度。
当各步的实验条件知道后，最后才正式测量。这时只关心后面两个杂化过程的CV或EIS与浓度的相关性。
根据很多 ...

非常感谢您的建议 以为没人应助就没继续关注了 现在不能送金币了 口头上感谢一下
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5楼2013-03-15 11:49:42
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ifiwereaboy

金虫 (小有名气)
MCH是啥 干嘛用的。。菜鸟请问
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6楼2013-03-22 19:09:41
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