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JNVBNC

金虫 (小有名气)

16S不适合做内参基因,因为16S的量相比其他mRNA的量来讲,太高了。看着你的RNA质量还是可以的,如果cDNA扩不出目的基因,可能是不表达。对于细菌,你可以先用gDNA测试一下引物,在保证引物没问题的前提下,在测目的基因的表达。
11楼2013-12-12 11:34:43
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yangqi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by JNVBNC at 2013-12-12 11:34:43
16S不适合做内参基因,因为16S的量相比其他mRNA的量来讲,太高了。看着你的RNA质量还是可以的,如果cDNA扩不出目的基因,可能是不表达。对于细菌,你可以先用gDNA测试一下引物,在保证引物没问题的前提下,在测目的 ...

你好,请问细菌里边用什么内参比较好呢?谢谢!
人生,只有坚强,才能美好!
12楼2013-12-17 09:09:45
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JNVBNC

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by yangqi at 2013-12-17 09:09:45
你好,请问细菌里边用什么内参比较好呢?谢谢!...

你试试GAPDH的基因吧gap
13楼2013-12-17 16:00:26
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yangqi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by JNVBNC at 2013-12-17 16:00:26
你试试GAPDH的基因吧gap...

好的,非常感谢!
人生,只有坚强,才能美好!
14楼2013-12-19 14:01:51
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18428388448

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhqu1234 at 2012-08-10 12:50:07
1.楼主的基因是否为低拷贝基因?我曾经克隆一个低拷贝基因,提了50个RNA样品,只有3个扩增出来了。楼主扩增不出可能跟所提样品太少有关系。
2.楼主的基因是否是较长片段?由于RNA降解导致cDNA不完整,如果片段较长 ...

请问大佬,3的taq酶有推荐嘛?我也是反转录后PCR全是二聚体,猜测是酶的原因
15楼2021-07-29 20:59:36
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