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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
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JNVBNC

金虫 (小有名气)
16S不适合做内参基因，因为16S的量相比其他mRNA的量来讲，太高了。看着你的RNA质量还是可以的，如果cDNA扩不出目的基因，可能是不表达。对于细菌，你可以先用gDNA测试一下引物，在保证引物没问题的前提下，在测目的基因的表达。
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11楼2013-12-12 11:34:43
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yangqi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by JNVBNC at 2013-12-12 11:34:43
16S不适合做内参基因，因为16S的量相比其他mRNA的量来讲，太高了。看着你的RNA质量还是可以的，如果cDNA扩不出目的基因，可能是不表达。对于细菌，你可以先用gDNA测试一下引物，在保证引物没问题的前提下，在测目的 ...

你好，请问细菌里边用什么内参比较好呢？谢谢！
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人生，只有坚强，才能美好！
12楼2013-12-17 09:09:45
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JNVBNC

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by yangqi at 2013-12-17 09:09:45
你好，请问细菌里边用什么内参比较好呢？谢谢！...

你试试GAPDH的基因吧gap
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13楼2013-12-17 16:00:26
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yangqi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by JNVBNC at 2013-12-17 16:00:26
你试试GAPDH的基因吧gap...

好的，非常感谢！
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人生，只有坚强，才能美好！
14楼2013-12-19 14:01:51
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18428388448

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhqu1234 at 2012-08-10 12:50:07
1.楼主的基因是否为低拷贝基因？我曾经克隆一个低拷贝基因，提了50个RNA样品，只有3个扩增出来了。楼主扩增不出可能跟所提样品太少有关系。
2.楼主的基因是否是较长片段？由于RNA降解导致cDNA不完整，如果片段较长 ...

请问大佬，3的taq酶有推荐嘛？我也是反转录后PCR全是二聚体，猜测是酶的原因
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15楼2021-07-29 20:59:36
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