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yuehuawaiwai

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助!

请哪位大侠指点一下:将细胞破碎后,取上清液,如何判断此上清液中是否含有蛋白酶和乳糖酶,谢谢!~~
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张朝非

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2012-08-10 16:19:12
测定其酶活如何!具体使用分光光度计    这个就得先做酶活标准曲线了  然后再测定酶活
人生需要自己去掌控
3楼2012-08-10 11:01:07
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
利用底物检测一下,蛋白酶底物比较多,如Glt-ALA-ALA-phe-MCA等,乳糖酶底物如邻硝基苯酚- β- D - 吡喃半乳糖苷等。
2楼2012-08-10 09:17:40
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yuehuawaiwai

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 张朝非 at 2012-08-10 11:01:07
测定其酶活如何!具体使用分光光度计    这个就得先做酶活标准曲线了  然后再测定酶活

可以给出点具体的方案么!~~
4楼2012-08-10 11:38:40
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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yuehuawaiwai: 回帖置顶 2012-08-12 18:36:55
yuehuawaiwai: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-12 18:37:18
yuehuawaiwai: 金币+1, ★★★很有帮助, 太感谢你了,方法真的很不错 2012-08-28 08:29:35
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuehuawaiwai at 2012-08-10 11:38:40
可以给出点具体的方案么!~~...

2L和3L差不多已经给了答案。
1、你分别设计一个测定这两种酶的体系,包含缓冲液、底物(多肽和乳糖)、破碎上清液,然后做一个对照(把破碎上清换成缓冲液)。
2、每种底物在分光光度计下,在特定波长有最佳吸收。分别在该波长下测定反应前后的吸光值,就能初步判断了。
3、多尝试几个底物,破碎上清液一般都含有蛋白酶的。
生活的乐趣在于善于发现美,学会欣赏美
5楼2012-08-10 16:05:10
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