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happyhehe

新虫 (初入文坛)

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[求助] 酶反应

现在在做酶反应水解皂苷，但是一直没找到合适的酶以及酶的水解条件，请问：在筛选酶的过程中，正确的流程是怎样的？是先确定水解条件还是酶？很矛盾。有没有关没酶筛选的大体流程呢？最近做这个实验非常纠结，望高手指点，谢谢！！

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1楼 2012-08-06 14:45:44

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547star

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
happyhehe: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2012-08-08 16:46:05

看筛选的目的，一般先出酶活，再考虑条件，这个时候一般用中性pH，不添加重金属离子，但可以加Na,Mg；如果酶容易得，可直接以一定的条件来筛选，但是不要太多，可以先考虑pH，其次是耐受底物抑制，就是底物浓度稍高一些，如果知道是催化哪种反应的，可考虑提高产物，看耐受产物抑制的程度。
如果是直接买各种商品酶来试验，可考虑先用比较经济的条件统一试，或者以各种酶的最优反应条件分别试，找到最好的酶再进一步优化，再做固定化之类的研究。

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为什么

2楼2012-08-07 10:33:49

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