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happyhehe

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶反应

现在在做酶反应水解皂苷,但是一直没找到合适的酶以及酶的水解条件,请问:在筛选酶的过程中,正确的流程是怎样的?是先确定水解条件还是酶?很矛盾。有没有关没酶筛选的大体流程呢?最近做这个实验非常纠结,望高手指点,谢谢!!

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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
happyhehe: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2012-08-08 16:46:05
看筛选的目的,一般先出酶活,再考虑条件,这个时候一般用中性pH,不添加重金属离子,但可以加Na,Mg;如果酶容易得,可直接以一定的条件来筛选,但是不要太多,可以先考虑pH,其次是耐受底物抑制,就是底物浓度稍高一些,如果知道是催化哪种反应的,可考虑提高产物,看耐受产物抑制的程度。
如果是直接买各种商品酶来试验,可考虑先用比较经济的条件统一试,或者以各种酶的最优反应条件分别试,找到最好的酶再进一步优化,再做固定化之类的研究。
为什么
2楼2012-08-07 10:33:49
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